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第一部分小鼠耳后心脏一直模型的建立目的:建立一种改良的小鼠心脏移植模型,以进行心脏移植免疫排斥的研究。方法:受体小鼠麻醉、耳廓消毒,于耳廓背侧中线下1/3处做3～4 mm横切口,沿皮下用眼科颞向耳尖方向钝性分离,形成一个约2 mm×5 mm狭长皮下孔道,末端稍扩大成囊袋状,充以乳酸林格氏液;24h之内的新生乳鼠剑突下取心,置于0～4℃无菌乳酸林格氏液中搏动1至2次;心脏置入受体准备好的皮下囊袋中,心脏离体时间2分钟以内。结果:初期同系小鼠心脏移植存活率达80%,同种异体移植存活率达63.6%,熟练操作后同种异体移植存活率达98.1%。结论:该改良型小鼠耳后心脏移植模型稳定且易于观察,实验结果证明已成功建立起小鼠耳后心脏移植模型。第二部分CTLA4Ig联合雷帕霉素对小鼠心脏移植排斥的影响目的:观察雷帕霉素联合CTLA4 Ig对小鼠心脏移植存活时间的影响。方法建立小鼠耳后心脏移植模型,随机分为四组:A组对照组不给药,B组移植后0,2,4d腹腔注射CTLA4 Ig 150ug/kg,C组移植后当天开始连续14天灌胃给予雷帕霉素1mg/kg,D组移植后0,2,4d腹腔注射CTLA4 Ig 150ug/kg,连续14天灌胃给予雷帕霉素1mg/kg;观察各组移植心脏存活时间,移植后第八天取材送检,HE染色观察心肌浸润情况。结果:小剂量CTLA4和雷帕霉素联合用药较对照组、单独用药组心脏移植存活时间虽短暂延长,但差异不具有显著性;联合用药组淋巴细胞浸润较其他组明显减少。结论:小剂量CTLA4Ig和雷帕霉素联合用药在未能有效延长移植心脏存活时间的情况下已初步表现出抑制心脏移植免疫排斥的协同作用。第三部分CTLA4Ig、ICOSIg联合雷帕霉素对心脏移植排斥的影响目的:观察CTLA4Ig、ICOSIg联合雷帕霉素对小鼠心脏移植排斥的影响。方法:建立小鼠耳后心脏移植模型,随机分为四组:A组对照组不给药,B移植后0,2,4d腹腔注射CTLA4Ig 250ug/kg,1,3,5d腹腔注射ICOSIg 100ug/kg,C组移植后0～14d腹腔注射雷帕霉素0.5mg/kg,D组移植后0,2,4d腹腔注射CTLA4Ig 250ug/kg,1,3,5d腹腔注射ICOSIg 100ug/kg, 0～14d腹腔注射雷帕霉素0.5mg/kg;观察各组小鼠移植心脏存活时间;移植后第八天取材送检HE染色,观察心肌淋巴细胞浸润情况;免疫组化指标检测心肌bcl-2,bax表达。结果:1. A组存活时间为13.1天,B组存活时间13.7天,C组存活时间19.4天,D组存活时间22天。D组较其他组有显著差异;2. D组心肌淋巴细胞浸润较其他组明显减轻;3. D组bcl-2表达较其他组明显增多,bax表达较其他组明显减少,提示心肌细胞凋亡较其他组明显减轻。结论:CTLA4Ig、ICOSIg联合雷帕霉素三者协同作用能较其他组明显抑制急性排斥反应,改善移植心脏存活状况。