论文部分内容阅读
本实验从保护剂、卵母细胞发育阶段、冷冻方法及冷冻液中是否添加蔗糖四个方面,比较研究对山羊卵母细胞冷冻效果的影响,总结如下: 1.采用程序冷冻法对山羊MⅡ期卵母细胞进行冷冻,比较1.8mol/L EG为保护剂的冷冻液内添加0.1mol/L蔗糖与否对卵母细胞冷冻效果的影响,结果表明冷冻液内添加蔗糖对解冻后卵母细胞的形态无显著影响,但可显著提高卵母细胞孤雌激活后的卵裂率及桑椹胚发育率。证明冷冻液内中添加非渗透性保护剂蔗糖可显著提高解冻后卵母细胞的发育潜力。 2.分别用1.8mol/LEG、1.5mol/LPROH、1.5mol/LDMSO及1.5mol/L GL为冻存保护剂,并添加0.1mol/L蔗糖,对GV期、体外成熟培养10h和24h(MⅡ)的山羊卵母细胞进行冷冻保存,从形态正常率、卵裂率、桑椹胚的发育率三方面综合分析,四种保护剂地效果依次为EG>PROH>DMSO>GL,EG的保护作用最强,而GL的保护作用最差。 3.分别以EG、PROH、DMSO和GL配合蔗糖为程序冷冻剂对成熟培养10h和MⅡ期山羊卵母细胞进行冷冻保存,从形态正常率、卵裂率、桑椹胚的发育率三方面综合分析,MⅡ期卵母细胞的冷冻效果显著优于GV期和体外成熟10h的卵母细胞,表明MⅡ期卵母细胞更适于卵母细胞的冷冻保存。 4.以1.8mol/LEG添加0.1mol/L蔗糖为保护剂,程序法和OPS玻璃化冷冻GV期、成熟培养10h和24h的山羊卵母细胞。结果表明:程序法冷冻的卵母细胞形态正常率与玻璃化冷冻的卵母细胞间差异不显著,但程序冷冻的卵母细胞孤雌激活后卵裂率及桑椹胚发育率均显著高于玻璃化冷冻的卵母细胞。