论文部分内容阅读
类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种慢性系统性自身免疫疾病,其基本病理特征表现为滑膜炎、关节滑膜炎症细胞浸润、滑膜细胞异常增殖、血管翳形成以及关节软骨和骨损伤等。文献报道RA患者以女性居多,男女患者比例约为1:4。女性RA患者的临床症状在月经周期的排卵后期和妊娠期得到缓解。RA患者滑液(synovial fluid,SF)中雌激素产生增加且与雄激素的比例增大。以上证据表明雌激素影响RA的病理过程。肽基精酰胺脱亚胺基酶(peptidylarginine deiminase4,PADI4)是RA的一个重要关联基因,主要通过瓜氨酸化作用将蛋白质中的精氨酸残基转变为瓜氨酸残基,进而引起RA自我免疫反应和关节组织破坏。研究人员发现雌激素可上调PADI4的表达,提示雌激素可能通过调节PADI4的表达参与RA的病理途径。TXNDC5(thioredoxin domain containing protein-5,TXNDC5)属于硫氧还蛋白(thioredoxin,TRX)家族,具有与蛋白二硫键异构酶(protein disulfideisomerase,PDI)结构域高度类似的序列以及生物学活性。我们实验室利用蛋白质组学的方法发现RA患者的滑膜组织以及滑液特异性高表达TXNDC5。研究表明在低氧状态下,TXNDC5在内皮细胞中可辅助内皮抑素-1、肾上腺髓质素等的折叠或分泌,推测TXNDC5可能通过行使PDI的功能参与RA的病理进程。尽管大量证据表明雌激素与RA存在相关性,但具体的病理机制还不清楚。雌激素是否通过上调PADI4的表达参与RA病理过程还有待于证实。TXNDC5的表达除受低氧调节外,是否还受雌激素的调节也不清楚。
目的：以胶原诱导关节炎(CIA)为RA模型,向动物注射雌激素,研究关节炎的病理变化和PADI4及TXNDC5在滑膜中的表达状况,进而探讨雌激素对RA发病过程的影响及其可能的病理机制。
方法：向雄性Lewis大鼠(n=16)尾根部皮下免疫Ⅱ型胶原(CⅡ,800μg/只),建立CIA模型。在CⅡ初次免疫后的第2、5、8、11、14、17、20、23天皮下注射17β-雌二醇(80μg/只)。分别于第0、28和35天收集血液,同时于第35天处死动物并收集滑膜。ELISA检测血清中TNFα、IL-1β和VEGF的含量;免疫组化、Western-Blot和real-time PCR.检测滑膜中PADI4和TXNDC5表达水平。
结果：⑴与只注射CⅡ相比,雌激素明显延缓CIA发病时间约6天(P=0.045),但对炎症程度及发病率没有显著影响；⑵与只注射CⅡ相比,血液中FNFα、IL-1β的含量没有显著改变,但是VEGF含量明显升高(P=0.023)；⑶免疫组织化学显示,PADI4主要表达于滑膜衬里及侵润的炎性细胞中,TXNDC5主要表达于滑膜衬里以及毛细血管的内皮细胞。雌激素干预下的CIA滑膜组织异常增殖并伴有毛细血管增生；⑷雌激素明显上调CIA滑膜中FXNDC5的表达水平(P＜0.05),但PADI4表达水平无明显变化。
结论：雌激素虽然能延缓关节炎的发病时间,但有可能通过上调FXNDC5表达,刺激滑膜毛细血管增生促进RA发病进程。这也可能是RA多发于女性的原因之一。