铁卟啉催化活性及其应用研究

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血红素(Heme)是血红蛋白(Hemoglobin)的重要组成部分,又称卟啉铁,是由四个吡咯类亚基围成的亚铁原卟啉。目前为止,实验室前期工作已证实血红蛋白能够催化酪氨酸(tyrosine,Tyr)与过氧化氢生成酪氨酸二聚体(dityrosine)并且产生较好的抗氧化效应,以及向内皮细胞中加入一定比例的血红蛋白酪氨酸混合物后检测细胞的增殖能力来探索血液代用品缺血再灌注时其对血管损伤保护的效果。基于其良好的抗氧化性,本实验探索了血红素和酪氨酸混合物在抗氧化化妆品中应用的可行性。通过进一步验证和研究其对皮肤细胞的保护效果,探索其产生的较稳定的催化抗氧化作用是否可以有效地清除多种原因造成的人体皮肤细胞氧化衰老,进而体现其在化妆品应用的价值。实验建立了两个氧化损伤模型,有效模拟皮肤细胞氧化损伤。它们分别是葡萄糖氧化酶损伤模型(葡萄糖氧化酶终浓度为10μM)和UVA光照损伤模型(UVA于正上方10cm处照射5min)。在此损伤条件下探索血红素和酪氨酸对HaCaT人永生化表皮细胞(immortalized human epidermal cells)所起到的保护作用。实验分别通过MTT法、检测LDH释放量、MDA的含量,检测细胞凋亡、细胞凋亡周期、蛋白质印迹法(Western Blot)这六方面来印证血红素和酪氨酸的抗氧化及保护效果。并且通过和三种已知的良好抗氧化剂:浓度均为50 μ M的维生素C(VC),维生素E(VE),BHT(butylatedhydroxytoluene)抗氧化效果的比较,我们发现酪氨酸和血红素混合物组(血红素终浓度为50 μM、酪氨酸为200μM)的抗氧化效果强于单独加入酪氨酸或血红素组的,并且抗氧化性相近甚至更优于同浓度的BHT、维生素C、维生素E。实验结果说明血红素本身就具备抗氧化的性质,而在酪氨酸和过氧化氢存在下,血红素一方面发挥其本身抗氧化性能,另一方面,它起到了催化酪氨酸氧化形成酪氨酸二聚体的作用。总的来说就是血红素和酪氨酸在氧化条件下有协同保护效果,体现了血红素酪氨酸混合物在抗氧化衰老化妆品方面的应用价值,也为后续进一步探索研究提供了理论依据。
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