AD是老年人代谢性疾病，患者本人过着依赖性生活，必须受到监护性照料，给患者家庭和所在社区带来了沉重的经济和社会负担，最后常因褥疮、骨折、肺炎等继发疾病而死亡。联合国对2002年和2050年60岁以上老年人分布的预测显示，2002年全世界有6.29亿(占总人口的10％)，中国有1.34亿(10％)；到2050年，全世界增至19.64亿(21％)，中国增至4.37亿(30％)，届时我国AD患者将增至550余万，居世界各国之首。另外，随着我国老龄化的进一步进展和人口构成与家庭结构的重大变异，“四二一”家庭(即四个老人，二个成人，一个孩子)不断增多，AD发病率呈现上升趋势。因此，研究AD的发病机制、研发AD的防治药物不仅是医学问题，而且对我国的可持续发展也有重要意义。 AD的发病原因不清楚，目前有遗传学说、胆碱能神经元溃变学说、雌激素缺乏学说、慢性铝中毒学说、慢性炎症学说等。铝在AD发病过程中具有重要作用，AD患者脑铝含量升高。慢性铝中毒可以造成模型动物脑内出现大量NTFs、APP蛋白水平升高、Abeta沉积增多和大量神经元丢失等。 中医认为“肾为先天之本，藏精，主智，主骨，生髓，髓生血，髓通脑。”中医认为AD的病因是本虚，伴有血瘀、痰淤、肝失疏泻等实症。李恩教授对于包括AD在内的老年性代谢性疾病的研究和防治提出了“肾-骨-髓-血-脑”一体论的学术思想。 为了进一步研究铝在AD发病中的作用，探讨补肾填精方防治AD的机制，我们从“一体论”的角度比较了慢性铝中毒大鼠与AD疾病的相似性，研究了补肾填精方防治慢性铝中毒大鼠AD疾病模型的效应和机制。 选用6月龄雌性SD大鼠60只，体重240g～260g，随机分为正常组(N组)、模型组(M组)、小剂量中药防治组(T1组)和中剂量中药防 中文摘要治组厂 组卜 AD大鼠模型用长期腹腔注射氯化铝制造。M组、TI组和TZ组大鼠腹腔注射lml0）AICI。溶液，连续注射3天付天，4天为一个周期，共计18个周期；N组大鼠按上述方法腹腔注射生理盐水。TI组和 TZ组每天灌胃 lml补肾填精方煎液，连续灌胃 7天用大，8大为一个周期，共计9个周期。TI组灌胃药液生药含量相当于成人剂量的 5倍，TZ组相当于成人剂量的 10倍。补肾填精方防治和 AD疾病造模同时进行。补肾填精方由川尊、熟地、获菩、郁金、石蔓蒲、淫羊蓄、当归、黄蔑和何首乌组成。 大鼠学习记忆能力和精神状态用Y－电迷宫测定。端脑、海马和血清EZ、Abeta与 EPO含量用放免法测定。端脑和海马 ER o与 ER 6蛋白的 厂表达量用免疫组化法检测。骨密度用双能X－线骨密度仪测定。 组织总RNA的提取用异硫氰酸肌一步法。用RTPCR检测端脑。海马和肾脏组织 APP m枷A异构体表达量。GAPDH引物的正链为5－cccacggcaagttcaacggca－3，负链为5－tggcag卵ctccaggcggc－3”，PCR产物长度为606hp；APP弓物的正链为5”－gactccgatgtctggtgggg－3，负链为了－tgtcagc＊gggcaaattctt－3，PCR产物长度为445hp、502hp、613hp和 670hP，分别代表APP。。。、APP，；。、APP，。；不 APP，，。。端脑和海马APP695与GAPDH的表达量用同管PCR检测，肾脏APP异构体的表达用单管 PCR检测。端脑和海马 APP PCR产物的半定量用KPP。。；辉度 X象素＊（GAPDH辉度X象素）表示，肾脏APP mRNA异构体表达量差异用（APP695辉度X象素＊（APP770辉度X象素＋APP751辉度X象素＋APP714辉度X象素）表示。 RTPCR产物的回收用低熔点琼脂糖凝胶回收法。载体DNA与目的 DNA的连接按pGEM丁 Vector连接试剂盒说明书进行。感受态大肠杆菌的制备和转化用氯化钙和热休克处理法进行。重组质粒的筛选用LacZ基因功能失活法。DNA序列测定用改良Sanger法。 实验结果数值用X士X表示。除了大鼠在Y－迷宫中的逃避正确率的比较用秩和检验以外，所有其它实验数值都用t检验比较组间差异显著性口 结果显示，正常大鼠、慢性铝中毒大鼠和补肾填精方干预大鼠在整 2 中文摘要 一 体、病理和分子等多方面存在明显差异： l各组大鼠学习记忆能力和精神表现 和N组比较，M组大鼠逃避启动障碍，逃避正确率降低o＜0刀5人 逃避潜伏期延长p＜0．05人 癫狂症状明显；和M组比较，TI组和n 组大鼠的逃避启动好转，逃避正确率增高p＜0刀5），逃避潜伏期缩短 （P＜0刀5，P＜0刀1），癫狂症状减轻。 2各组大鼠端脑和海马组织细胞形态 和N组比较，M组大鼠端脑组织脆性增加，神经元丢失，神经元肿 大，卫星现象和噬神经现象增多，胞核收缩变性，有双核现象，胶质细 胞增多。和 M组比较，TI组和 TZ组大鼠端脑神经元丢失和胶质细胞激 活减少，未见到胞核收缩变性和双核现象，TI组神经元肿胀消退、TZ