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Ghrelin与Obestatin主要由胃分泌，是两种具有调节食欲和能量稳态等多种生物学作用的多肽。为研究猪Ghrelin(pGhrelin)与Obestatin(pObestatin)对仔猪肝细胞与脂肪细胞生物学功能的调节作用，本论文开展了以下四个试验。
试验一pGhrelin和pObestatin对仔猪原代肝细胞增殖与凋亡的影响。建立仔猪原代肝细胞无血清培养模型，用不同剂量pGhrelin或pObestatin处理，以MTT法检测细胞增殖；选择100nM pGhrelin或pObestatin单独处理及分别与[D-Lys3]-GHRP-6、Tyrphostin 23、PD98059和GF109203X共处理肝细胞48h，检测细胞增殖情况；此外，以不同剂量pGhrelin或pObestatin处理肝细胞，检测与细胞凋亡相关酶Caspase-3的活性。
试验二pGhrelin和pObestatin对仔猪原代肝细胞分泌功能及其相关基因mRNAs表达的影响。不同剂量pGhrelin或pObestatin处理原代培养的仔猪肝细胞24h。收集培养上清液和肝细胞，测定上清液中总蛋白、白蛋白、甘油三酯、总胆固醇、ALP、AST、ALT、尿素氮、葡萄糖、IGF-I、总胆汁酸、Apo-AI、Apo-B、HDL、IGF-I、肝细胞总蛋白等指标。采用不同剂量pGhrelin或pObestatin分别处理肝细胞，以RT-PCR方法检测肝细胞内参照基因13-actin、pGHS-R1a、GPR39、LXRα、PPAR-α、IGF-I与TORC2、PEPCK、HMGCoA、HSL、ACC-α、FAS、Apo-AI与Caspase-3等基因的mRNA表达丰度。
试验三pGhrelin和pObestatin对仔猪原代脂肪细胞增殖、分化与凋亡的影响。建立了原代脂肪细胞无血清培养模型，用不同剂量pGhrelin或pObestatin处理脂肪细胞，于不同时段检测细胞增殖；选择100nM pGhrelin或pObestatin单独处理及分别与[D-Lys3]-GHRP-6、Tyrphostin 23、PD98059和GFl09203X共处理背部或腹部皮下脂肪细胞48h，检测细胞增殖；以100nM pGhrelin或pObestatin处理脂肪细胞，检测Caspase-3的活性。
试验四pGhrelin和pObestatin对仔猪原代脂肪细胞分泌功能及其相关基因mRNAs表达的影响。采用100nM pGhrelin或pObestatin分别处理仔猪背部与腹部皮下脂肪细胞。测定细胞内甘油三酯以及上清液中葡萄糖、Leptin、甘油、Caspase-3与脂肪细胞总蛋白等指标。采用100nM pGhrelin或pObestatin分别处理脂肪细胞。24h后收集各组脂肪细胞， RT-PCR方法检测脂肪细胞内参照基因13-actin、pGHS-R1a、GPR39、PPAR-γ、Ob、PEPCK、TORC2、G-3-PDH、HSL、ACC-α、FAS、ADD1/SREBP1、Adiponectin、ADFP/AdipOphilin、ATGL、C/EBPα、LPL、Caspase-3与Sirt1等基因表达丰度。