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有研究发现,复苏中增加肾上腺素的用量,尽管可以增加心脑灌注压和血液灌流量,但同时可能对心肌和脑组织造成损害,终导致复苏成功率下降。而山莨菪碱（anisodamine,Ani）具有增加冠脉血流量、改善微循环、降低血小板聚集、抑制血栓形成、减轻心肌及脑组织的缺血/再灌注损伤等作用。心肺复苏早期应用Ani干预可能会改善组织的灌注,改善复苏后心肌及脑组织的功能,减轻肾上腺素的负作用,以期提高复苏成功率和改善预后,本研究对山莨菪碱在心肺复苏中的作用进行实验研究以探讨其对缺血心肌细胞的保护作用。目的在建立一个标准化大鼠心脏骤停及心肺复苏模型基础上,应用盲法给药,观察山莨菪碱对心脏骤停大鼠心肌及脑组织代谢的影响,并进一步从细胞凋亡观察山莨菪碱对缺氧/复氧心肌细胞的作用。方法实验共4部分:第一部分,成年Sprague-Dawley（SD）大鼠30只,随机分成两组,生理盐水对照组（n=15）,肾上腺素组（n=15）。采用交流电生理刺激仪经食道调搏诱发心脏骤停模型,5min后开始心肺复苏,应用自行设计大鼠心脏胸外按压机进行心脏按压。观察心脏骤停类型分布,诱发成功时间,自主循环恢复率及复苏成功率,试验后尸体解剖观察食道及心脏有无灼伤,内脏有无破裂。第二部分,模型操作同第一部分,65只sD大鼠随机分为5组,生理组（n=5）、生理盐水组（n=15）、肾上腺素组（n=15）、肾上腺素联合山莨菪碱组（n=15）、山莨菪碱组（n=15）,采用盲法给药,调搏前静脉注射2-[18F]氟-2-脱氧-D-葡萄糖（FDG）0.6ml。复苏后30min内留取部分实验大鼠心脏及脑组织进行放射性计数,留取静脉血送检血浆心房利尿钠肽。第三部分,在第二部分基础上留取存活大鼠脑及心肌组织,检测细胞晚期凋亡及电镜观察线粒体损伤情况。第四部份,细胞培养研究:取乳鼠心室肌细胞培养传一代后分成五组,正常生理对照组、缺氧/复氧组、肾上腺素组、肾上腺素联合山莨菪碱组、山莨菪碱组,缺氧2h/复氧12h,每组至少3瓶细胞。采用流式细胞仪检测缺氧/复氧后的细胞凋亡情况,同时用TUNEL法检测晚期细胞凋亡。RT-PCR法检测心肌细胞M1-3受体亚型的表达。结果1.所有大鼠均诱发心脏骤停成功,其中心室颤动10例（33.3%）,无脉搏电活动15例（50.0%）,心电静止5例（16.7%）,诱发时间60～150s;自主循环恢复率对照组为6.7%,肾上腺素组为46.6%;复苏成功率对照组为0,肾上腺素组为33.3%。食道粘膜存在轻度灼伤,心脏未见灼伤,食道及腹腔内脏未见破裂。2.肾上腺素联合山茛菪碱组复苏成功率为70%,高于其它各组,其复苏成功率分别为肾上腺素组33.3%、生理盐水组0、山莨菪碱组26.7%（P＜0.01）。肾上腺素复苏成功的心脏和脑组织放射性计数均明显低于肾上腺素联合山莨菪碱组,分别为心脏（25.71±2.83 vs 38.3±7.2,P＜0.05）,脑组织（16.06±2.93 vs31.02±2.72,P＜0.05）。肾上腺素联合山莨菪碱组及单纯山茛菪碱组复苏成功大鼠血浆心房利尿钠肽水平明显低于肾上腺素组,分别为（1963.1±1096.7,483.6±205.9vs 4417.6±2235.9,P＜0.05）,但均高于生理组（238.3±190.0,P＜0.05）。3.肾上腺素存活组的脑组织凋亡细胞百分数明显多于正常生理对照组及肾上腺素联合山莨菪碱组（8.85±1.2 vs 0.87±0.25,4.25±1.05,P＜0.01）,肾上腺素存活组的心肌组织凋亡细胞百分数明显多于正常生理对照组及肾上腺素联合山莨菪碱组（8.15±1.60 vs 2.13±0.65,4.07±1.55,P＜0.01）。肾上腺素联合山莨菪碱组复苏成功大鼠脑及心肌线粒体损伤明显较肾上腺素组轻。4.细胞培养:缺氧2h/复氧12h,肾上腺素组早期凋亡细胞明显高于其他各组（P＜0.01）,山莨菪碱组及肾上腺素联合山莨菪碱组早期凋亡细胞低于缺氧/复氧组。肾上腺素组晚期凋亡细胞明显高于山莨菪碱组（P＜0.01）,略低于缺氧/复氧组及肾上腺素联合山莨菪碱组,但无统计学意义。RT-PcR检测出心肌细胞M2受体亚型表达,组间表达相对量无统计学差异。结论1.经食道交流电调搏可建立稳定可靠的大鼠心脏骤停模型,应用大鼠电动心脏按压机可实现标准化心肺复苏实验要求。2.复苏早期应用山莨菪碱干预可以提高复苏成功率,改善心肌及脑组织的代谢,减轻线粒体的损伤,抑制心肌及脑组织细胞凋亡,对心肺复苏大鼠有保护作用。3.山莨菪碱可减少细胞凋亡,对缺氧/复氧心肌细胞有保护作用。