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脂肪组织是哺乳动物体内能量存储场所,在机体能量代谢中发挥重要的作用,随着研究的深入,人们发现,脂肪组织还具有内分泌功能和免疫调节功能,但其与免疫系统的关系至今尚不清楚,因而,本实验以3-7日龄健康长白猪为实验动物,以培养的前体脂肪细胞为研究对象,用免疫细胞因子干扰素-γ(interferon-γ, IFN-γ)处理前体脂肪细胞,采用MTT比色、油红O染色提取法、半定量RT-PCR和免疫印迹等方法,研究了其对猪前体脂肪细胞增殖分化及脂解作用的影响。得出如下研究结果:1.检测IFN-γ对猪前体脂肪细胞增殖的影响。采用MTT比色法检测了在不同浓度IFN-γ作用下,其对猪前体脂肪细胞增殖能力的影响。结果表明,100 IU/mL和1000 IU/mL的IFN-γ显著抑制前体脂肪细胞的增殖(p<0.05),抑制效果呈时间和剂量依赖性;而10 IU/mL的IFN-γ对增殖的影响与对照组相比在处理第2天和第4天差异不显著,之后在第6、第8和第10天差异显著(p<0.05)。2.研究IFN-γ对猪前体脂肪细胞分化的作用。采用油红O染色提取法、形态学观察法,检测了IFN-γ对脂肪细胞内甘油三酯积聚量的变化以及前体脂肪细胞充脂率、充脂程度及形态变化的影响,结果显示,10 IU/mL、100 IU/mL和1000 IU/mL的IFN-γ均显著抑制猪前体脂肪细胞的分化(p<0.05),其抑制作用呈剂量依赖性;用半定量RT-PCR检测IFN-γ对猪前体脂肪细胞分化标志基因LPL和PPARγ2转录水平表达的影响,结果表明,在分化过程中可IFN-γ下调LPL和PPARγ2 mRNA的表达;用免疫印迹(Western blot)检测IFN-γ对PPARγ蛋白表达的影响,结果显示,IFN-γ可下调PPARγ1和PPARγ2的表达。3.研究IFN-γ对猪脂肪细胞脂解相关基表达的影响。采用半定量RT-PCR技术分析100 IU/mL和1000 IU/mL两种浓度的IFN-γ对脂肪细胞脂解相关基因ATGL、TGH和HSL mRNA表达的影响;结果显示,成熟猪脂肪细胞中100 IU/mL和1000 IU/mL的IFN-γ均能诱导ATGL、TGH和HSL mRNA表达,1000 IU/mL的IFN-诱导作用明显高于100 IU/mL(p<0.05),同时,这三种基因对IFN-γ的敏感性不同,其中,HSL最敏感,其次是TGH ,ATGL最不敏感。以上结果表明,IFN-γ抑制猪脂肪细胞的增殖和分化,促进脂解。