[目的]随着环境污染的日益严重,大气臭氧层被破坏,紫外线的辐射水平增加。长期或过量的紫外线辐射会造成皮肤光损伤,包括光老化、光过敏、光毒性反应甚至光致癌,严重的影响了人们的身心健康。关于光损伤的防治目前应用最广泛的是涂抹防晒霜和应用小分子抗氧化剂,然而防晒霜中添加的化学物质对人体具有副作用,小分子抗氧化剂由于稳定性差、活性低等缺陷受到限制。因此,研发活性更高、副作用更小的新型抗光损伤的药物在皮肤光损伤的治疗中尤为必要。近年来,多肽分子因其在体内具有高度选择性和有效性、与受体的亲和力高、相对安全和耐受良好等优势已成为治疗多种疾病的候选药物,受到越来越多的关注,但多肽分子在干预皮肤光损伤中的研究仍处于起步阶段。本次研究课题旨在对新型抗氧化多肽OA-GI13在皮肤光损伤治疗中的作用及机制进行初步的研究和探索。[方法]野外捕捉活体云南臭蛙,利用基因组学的方法构建臭蛙皮肤的cDNA文库,确定多肽的一级结构即氨基酸序列后进行人工合成;得到多肽样品后,通过体外自由基清除实验检测多肽的抗氧化活性;通过细胞毒性测定、溶血活性测定检测多肽的毒性;用过氧化氢（Hydrogenperoxide,H2O2）刺激人角质形成细胞（HaCaT）,构建体外氧化应激模型并用多肽进行处理,利用细胞活性实验检测多肽对细胞的保护作用;用中波紫外线（Ultraviolet B,UVB）照射小鼠背部皮肤,构建急性光损伤模型并用多肽进行治疗,拍照记录小鼠背部皮肤表观变化,并通过苏木精-伊红染色（Hematoxylin-Eosin staining,HE）和Masson三色染色来观察小鼠皮肤表皮和真皮的变化,评估多肽对光损伤的治疗作用;利用生化实验来检测多肽对体内和体外氧化应激相关指标的影响;利用蛋白印迹分析（Western Blot,WB）实验探究多肽发挥作用的机制。[结果]1.在本项研究中,从云南臭蛙皮肤的cDNA文库中鉴定的多肽前体,该前体由325个碱基对和59个氨基酸残基编码,成熟肽序列为“GIWAPWPPRAGLC”,通过在NCBI数据库的BLAST搜索发现不存在与该前体相同的两栖类生物活性肽,因此该肽是一个新型多肽;2.OA-GI13在1 nM和10 nM浓度下具有对自由基2’-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸（2,2’-azino-bis（3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid）,ABTS+）和 2,2-二苯基-1-苦肼基（2,2-diphenyl-1-picrythydrazy l,DPPH）的清除能力;3.OA-GI13 在 100 pM,1 nM,10 nM的浓度范围内对小鼠红细胞无溶血活性,对HaCaT细胞无细胞毒性;4.当受到H2O2刺激时HaCaT细胞活力显著降低,OA-GI13在1 nM和10 nM浓度下可维持HaCaT细胞抵抗H2O2刺激的活力;5.OA-GI13降低了 H2O2刺激下HaCaT细胞氧化应激水平,OA-GI13在浓度为1 nM和10 nM时,均可提高细胞内抗氧化剂超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）、过氧化氢酶（Catalase,CAT）和谷胱甘肽（Glutathione,GSH）的水平,同时,降低乳酸脱氢酶（Lactate dehydrogenase,LDH）的释放;6.OA-GI13能够减轻UVB照射诱导的小鼠背部红斑的生成,并且通过降低皮肤弹性和水分减轻了水肿,其中,在剂量为10nM时对红斑和水肿的修复效果最好;7.OA-GI13能够减少小鼠表皮的晒伤细胞,使真皮胶原纤维排列均匀有序,在10 nM剂量下显示出最佳效果;8.OA-GI13降低了 UVB诱导的小鼠皮肤氧化应激水平,OA-GI13在浓度为1nM和10 nM时,均可提高皮肤内抗氧化剂SOD、CAT和GSH的水平,降低脂质过氧化物（Lipid peroxide,LPO）、丙二醛（Malondialdehyde,MDA）和 8-羟基-2’-脱氧鸟苷（8-hydroxy-2-deoxyguanosine,8-OHdG）的水平;9.OA-GI13 能够抑制 H2O2刺激细胞后和UVB照射皮肤后p38蛋白的磷酸化,从而发挥抗氧化应激的作用。[结论]1.从云南臭蛙的皮肤中鉴定出的一种新型抗氧化多肽,成熟肽的氨基酸序列为“GIWAPWPPRAGLC”,并将其命名为OA-GI13;2.OA-GI13具有对自由基ABTS+和DPPH的清除能力且无溶血活性和细胞毒性;3.OA-GI13能够提高细胞和皮肤内的抗氧化剂的水平,发挥抗氧化活性;4.OA-GI13能够减轻小鼠背部的红斑和水肿,保护皮肤表皮和真皮,缓解UVB诱导的皮肤急性光损伤;5.OA-GI13在体内外均能抑制p38蛋白的磷酸化,表现出抗氧化应激的能力。