生物反应器无血清悬浮培养重组CHO细胞生产HBsAg

来源 :华东理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:laofei
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本文研究建立了一种针对重组CHO细胞的无血清培养基SFMC,经过对有血清贴壁生长的CHO细胞的适应性培养,使其在SFMC培养基中悬浮批培养的最大细胞密度达到了4×106 cells/ml,HBsAg表达量达到1.5 mg/L。   葡萄糖是重组CHO细胞在无血清悬浮培养过程中最重要的营养物质,细胞的生长受葡萄糖限制,葡萄糖耗尽后,细胞即停止生长,并逐渐死亡。细胞对pH的适应性较好,在pH6.3~7.8范围内细胞均可以正常生长,但是随着pH的升高,其代谢过程中乳酸对葡萄糖的得率增加。小于4.5 mmol/L的氨浓度和小于450 mosm/kg的渗透压都不会对细胞的生长造成明显影响。   在生物反应器培养中,根据代谢研究数据建立了重组CHO细胞的营养模型,并根据具体的培养工艺设计了控制模型。以此为依据的葡萄糖限制流加培养和限制性流加灌注培养均取得了较好的结果。在流加培养过程中,培养了190h,最大活细胞密度达到5.1×106 cells/ml,HBsAg产量达到2.3 mg/L。在限制性流加灌注培养过程中,培养470 h,最大活细胞密度达到了1.38×107cells/ml,最大HBsAg生产能力为0.7mg/(L·d)。   在摇瓶培养中,在0h加入1%以上的DMSO对细胞的生长有明显的抑制作用,但提高了HBsAg的产量,其中以1.5%的添加量效果最好,在分批培养中HBsAg产量可达到3.2 mg/L。流加培养过程中,当细胞密度达到1×106cells/ml时加入1.5%DMSO,培养190 h,最大活细胞密度为2.9×106 cells/ml,最大HBsAg产量达到了3.6 mg/L。对数生长末期32 h加入DMSO对细胞生长和HBsAg生产影响不大。
其他文献
金纳米团簇(AuNCs)是一种新型的纳米材料。尺寸小于3nm的金纳米团簇,以其类分子的特性而区别于典型的纳米颗粒。这种容易制备、易于功能化、光学性能稳定、生物相容性优良的
上一次见到沈总,他的身份还是瑞意恒动的创始人兼CEO,为我们解读社会化营销的成功经验、未来社会化媒体市场的发展趋势。而这次有幸采访到他,地点虽然是在瑞意恒动的会议室,
会议
香兰素是目前应用最为广泛的香料之一,主要合成路线为传统的化学合成法,存在工艺路线长,反应效率低,产品难分离,三废严重等缺点。本文利用绿色合成化学的观点,研究了催化氧化法合成
蛋白质的三维结构决定其功能,二硫键,离子对,疏水作用等结构因素都会影响蛋白质的热稳定性。大量的晶体结构研究表明,嗜温性和嗜热性的蛋白质内部疏水区域的序列和结构很保守