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目的:本研究观察黄癸素联合用药的体内和体外抗肿瘤作用;黄癸素抗肿瘤转移作用及其机制;黄癸素对化学诱导的仓鼠颊癌的防治作用。方法:(1)应用MTT法检测黄癸素联合临床常用药对体外培养肿瘤细胞增殖的抑制作用。(2)应用小鼠移植性实体瘤H22、S180的治疗试验观察黄癸素联合5-FU的体内抗肿瘤活性。(3)通过琼脂糖凝胶电泳法测定黄癸素对SW480细胞DNA拓扑异构酶活性的影响。(4)细胞-基质粘附实验检测黄癸素对B16细胞粘附能力的影响。(5)划痕实验检测黄癸素对B16细胞迁移能力的影响。(6)应用Transwell小室重建基底膜侵袭实验分析黄癸素对B16细胞趋化能力的影响。(7)免疫S-P法测定黄癸素对肿瘤细胞转移相关因子CD44V6表达的影响。(8)明胶酶谱法测定黄癸素对肿瘤细胞分泌基质金属酶MMP-2、MMP-9表达和活性的影响。(9)黄癸素对B16细胞C57BL/6小鼠实验性肺转移的影响。(10)黄癸素对H22细胞小鼠实验性肺转移的影响。(11)建立DMBA诱导的仓鼠颊囊癌变的动物模型,于6周、9周和12周系统观察黄癸素治疗组和对照组的局部病变情况,实验结束进行病理学检查。结果:一、黄癸素联合用药的抗肿瘤疗效及相关机制黄癸素联用羟喜树碱对SGC-7901、SW116、HepG2、SW480细胞具有显著的协同抑制作用,与5-FU联用对MGC-803、SGC-7901、SW116细胞具有协同抑制作用;与5-FU合用可显著抑制小鼠H22、S180实体瘤的在体生长;黄癸素对拓扑异构酶都Ⅰ、Ⅱ的活性均有抑制作用。二、黄癸素抗肿瘤转移作用及其机制初探黄癸素可抑制B16细胞与基质及内皮细胞的粘附,抑制作用呈浓度依赖性。划痕实验中,在原始致伤区的基础上,用药组细胞在Fn上的迁移均受到明显抑制。Transwell小室,药物与细胞作用48h后,细胞穿越基底膜的能力显著低于对照组,细胞侵袭数与药物浓度成反比。通过黄癸素作用的肿瘤细胞培养上清所表达的MMP-2、MMP-9活性较对照组有显著的降低。在体试验显示黄癸素有一定程度抑制C57BL/6小鼠黑色素瘤肺转移、小鼠H22肝癌肺转移的作用。三、黄癸素对化学诱导仓鼠颊癌的抑制作用黄癸素36、54、72mg/kg分别作用于DMBA诱导的仓鼠,第9周开始高剂量即有抑制病变发生的作用,第12周病理检查见其颊粘膜的不典型增生发生率、鳞癌发生率均有不同程度降低,54、72mg/kg组仓鼠颊粘膜的不良增生总发生率分别为66.6%、53.3%,比模型组(86.6%)分别降低了20%和33.3%。结论:黄癸素与5-FU、羟喜树碱对体外培养的多种肿瘤细胞具有协同抑制作用,可能与其对拓扑异构酶都Ⅰ、Ⅱ活性的抑制作用有关。在体试验表明黄癸素与5-FU合用可显著抑制小鼠H22、S180实体瘤的在体生长。细胞试验显示黄癸素可降低B16细胞的粘附、侵袭和迁移能力。在体试验显示黄癸素可抑制B16黑色素肿瘤和H22肝癌的肺转移。黄癸素对化学诱导仓鼠颊癌有抑制作用。