全血样品基体复杂,对于其中的DNA进行分析时,分离纯化操作常常是必要的。本论文以二氧化硅纳米粒子为DNA分离纯化的新型固相吸附剂,建立了一种快速、高效的DNA分离纯化方法,实现了全血中DNA的自动化在线萃取。第一章综述了DNA分离纯化的意义、发展历程和常用分离纯化方法,介绍了固相萃取法分离纯化DNA的原理、常用吸附材料,DNA在线固相萃取技术,以及纳米材料固相萃取方法研究进展,最后提出本论文的工作目的及设计思想。第二章建立了以二氧化硅纳米粒子为固相吸附剂的DNA分离纯化方法。探讨了二氧化硅纳米粒子萃取DNA的机理,考察了胍盐浓度、样品溶液pH值、吸附时间、吸附温度、洗脱液pH值、洗脱时间、洗脱温度等实验条件对分离纯化效率的影响。在饱和胍盐条件下,二氧化硅纳米粒子对DNA的吸附效率在0.5min内即可达到98%,二氧化硅纳米粒子对DNA的平均吸附容量达124ng/mg。在55℃条件下,以1×TE(pH8.3)溶液洗脱15min,DNA回收率可达90%。整个固相萃取过程在25min内就能完成。第三章制作了二氧化硅纳米粒子萃取柱,以顺序注射技术为样品预处理手段,建立了全血DNA在线纯化方法。通过对萃取柱进行加热,提高了DNA的回收率,优化了上样流速、洗脱流速、萃取柱温度等实验条件。在最佳实验条件下,在线纯化系统对于DNA的回收率达69%,整个萃取过程所需时间仅为4min。使用该纯化过程处理的人全血样品的DNA产物,通过PCR扩增反应,验证了二氧化硅纳米粒子作为固相吸附剂对全血样品中DNA提取的纯化效果。第四章对本论文建立的快速、高效DNA分离纯化系统进行了总结和展望。