【摘 要】
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本论文致力于进一步发展和完善A.meditteranei U32的遗传操作系统。 首先对适用于U32的选择性标记进行了筛选，结果表明来自pUC19E的红霉素抗性基因和来自pULAM2的淀粉酶基
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本论文致力于进一步发展和完善A.meditteranei U32的遗传操作系统。 首先对适用于U32的选择性标记进行了筛选，结果表明来自pUC19E的红霉素抗性基因和来自pULAM2的淀粉酶基因可以作为U32的选择性标记。 然后又以淀粉酶基因为报告基因构建了启动子探针pZCamyP~-，测试结果表明该质粒对U32glnA基因的启动子十分敏感，可以作为U32的启动子探针。 同时本论文还构建了携带U32glnA基因的质粒pULVK2.5GE。用它转化P32(glnA：：Am、Gin~-U32变株)，得到了可以在基本培养基上生长的菌株P32′。该结果表明U32的glnA基因负责编码谷氨酰胺合成酶。 本论文还尝试了用同源重组的方法中断和缺失U32的recA基因，但没有成功。该实验结果表明recA基因对于U32的存活十分重要。 此外本论文还用U32的recA基因互补了Ecoli.JM109(DE3)(RecA~-)，结果表明它能在一定程度上修复UV照射引起的损伤。 最后通过测序和序列分析来研究质粒pRLAm和质粒pULVK2A在拷贝数和丢失频率方面存在差别的原因。序列分析结果表明pULVK2A缺失的片段可能负责编码与质粒分配有关的parA和parB基因。
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