论文部分内容阅读
对慢性病理性神经痛机制的研究一直都在进行着,慢性压迫损伤(Chronic Constriction Injury,CCI)模型是一个研究慢性病理性神经痛机制的经典模型。为了研究其自发放电的机制,包括损伤区域局部发生的变化,本研究对损伤区域进行了结构观察,并检测部分金属阳离子通道蛋白质在损伤区域的表达分布与含量变化。本研究采用行为学、电生理记录、常规光镜及电镜观察,并结合免疫组织化学技术与western blotting等,对CCI模型损伤区域内的变化进行研究。具体结果如下：行为学检测发现CCI模型鼠患侧机械刺激反应及热刺激反应均有不同程度异常,表明其受到神经损伤影响,证明建模成功；电镜技术与常规形态学染色技术观察损伤区域局部,发现形态有变化；免疫组化检测结果显示,NF-H蛋白在对侧正常组织分布均匀,而在坐骨神经损伤区域分布改变,集中于结扎范围内,呈不均匀分散,聚集于长椭圆形结构中,类似于终球结构,而且随着时间延长,其表达在术后14、28天形状发生改变,并且逐渐有新生NF-H出现；BK通道蛋白在正常组织中没有,在坐骨神经损伤区域内出现,分布类似于NF-H,并且与NF-H分布有共同位置表达的趋势；Western blotting结果表明,随着时间延长,NF-H蛋白含量在术后4、7、14、28天的含量逐渐增加,呈现恢复正常组织含量的趋势,BK通道蛋白在术后4、7天损伤区域BK含量最高,术后14、28天的含量则较低,有动态变化,SK损伤区域术后7天损伤区域SK含量最高,术后4、14、28天的含量则较低,钙离子通道α2δ亚基只在术后4天在损伤区域检测到,术后7、14、28天在损伤区域中及对照组中均未检测到；应用电生理学技术,发现自发放电的频率与节律在损伤区施加了非特异性与特异性钙激活钾离子通道阻滞剂后,都发生了明显变化,自发放电频率减少,节律有稳定明显变化。上述结果表明：损伤神经区域发生了功能及形态学改变,并有其他新生金属阳离子通道蛋白出现,呈动态变化,这些变化与行为学异常有密切关系,提示神经痛自发放电现象可能有上述变化参与。