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目的：RIP140通过募集NF-κB共激活促进炎症因子的释放,本研究旨在分析初诊2型糖尿病患者R1P140的表达水平与炎症因子及游离脂肪酸的关系。方法：研究患者分为对照组(30名健康志愿者)和糖尿病组(24名初诊2型糖尿病患者),两组患者年龄、性别配对。测定患者身高、体重,抽取空腹血测定血浆游离脂肪酸(FFAs)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、空腹血浆胰岛素(FIN)、空腹血糖(FBG),采用稳态模型评估胰岛素抵抗指数[HOMA=FIN(μU/ml)×FBG(mmol/L)/22.5],分离外周血单个核细胞(PBMCs)荧光定量RT-PCR检测RIP140、肿瘤坏死因子α(TNF-α) mRNA水平,酶联免疫吸附实验(ELISA)测定血浆中TNF-α、白介素6(IL-6)浓度。从健康志愿者分离的PBMCs分别给予0、500μmol/L棕榈酸处理24h,荧光定量RT-PCR检测细胞RIP140及TNF-α、IL-6mRNA水平,Western blotting检测RIP140蛋白水平,ELISA法测定上清中TNF-α、IL-6浓度。分析糖尿病患者RIP140和其他变量的相关性。结果：两组患者年龄、性别、身高、体重、TC、LDL-c、ALT无统计学差异(均P>0.05)。糖尿病组HDL-c较对照组明显降低(P<0.01), FIN、FBG、TG、 HOMA-IR以及FFA浓度较对照组显著升高(均P<0.01)。糖尿病组RIP140、 TNF-α、IL-6表达较对照组明显增加(均P<0.01),且糖尿病组RIP140mRNA表达水平与FFA (r=0.667,P＜0.001). TNF-α mRNA (r=0.714, P<0.001)和蛋白(r=0.872,P<0.001)、IL-6蛋白(r=0.943, P＜0.001)、HDL-c (r=0.466, P=0.022). FIN(r=0.421,P=0.040)以及FBG(r=0.412, P=0.045)呈明显正相关。500μmol/L棕榈酸刺激的PBMCs RIP140、TNF-α、IL-6mRNA和蛋白水平较0μmol/L显著增加(IL-6mRNA P<0.05,其余均为P<0.01)。结论：初诊2型糖尿病患者RIP140表达上调,糖尿病患者RIP140表达水平与炎症因子TNF-α、IL6以及FIN、FBG、HOMA-IR和FFA密切相关。目的：探讨棕榈酸作用下小鼠巨噬细胞RIP140表达变化对炎症因子的影响,以及中药姜黄素能否调控RIP140的表达。方法：姜黄素作用RAW264.7细胞的最佳时间和浓度由噻唑蓝(MTT)法确定；小鼠巨噬细胞RAW264.7给予0、250、500μmol/L棕榈酸培养24h,倒置显微镜下观察细胞形态,荧光定量RT-PCR检测细胞中RIP140、TNF-α和IL-6mRNA表达,ELISA法测定上清中TNF-α、IL-6浓度;细胞分为姜黄素组和对照组,分别接受20μmol/L姜黄素和二甲亚砜(DMSO)预刺激1h后,均接受500μmol/L棕榈酸作用24h,倒置显微镜下观察细胞形态,测定细胞中RIP140、 TNF-α、IL-6mRNA水平和上清中TNF-α、IL-6浓度。采用单因素方差分析和t检验进行统计学处理。结果：姜黄素作用RAW264.7细胞的最佳时间为1h,最佳浓度为20μmol/L;500μmol/L棕榈酸处理后,细胞RIP140mRNA表达较0μmol/L刺激后显著升高(3.40±0.51vs.1.014±0.21,t=7.436,P<0.01);0、250、500μmol/L棕榈酸刺激后细胞TNF-α mRNA和浓度、IL-6mRNA和蛋白与棕榈酸呈剂量依赖性[TNF-α mRNA分别为1.00±0.03、1.79±±0.12、2.16±±0.13,F=99.308,P<0.01TNF-α浓度分别为(196.86±25.13)、(371.34±9.82)、(484.64±16.99) pg/ml, F=187.049, P<0.01; IL-6mRNA分别为1.00±±0.51、2.55±0.15、2.59±±0.17,F=152.958,P<0.01；IL-6浓度分别为(952.97±±65.93)、(1080.73±±36.05)、(1182.42±17.83)pg/ml,F=26.594,P<0.01];姜黄素组与对照组相比,RIP140mRNA (1.00±0.05vs.0.63±0.01, t=-13.79, P<0.01)、TNF-α mRNA (0.64±0.11vs.1.00±0.07, t=-4.532,P<0.05)和蛋白[(322.33±11.67) vs.(484.64±16.99) pg/ml, t=-13.577, P<0.01)、 IL-6mRNA (0.57±0.05vs.1.00±0.02, t=-14.167, P<0.01)和蛋白[(241.15±±46.76)vs.(1182.42±17.83) pg/ml, t=-44.810, P<0.01]均明显降低。棕榈酸处理细胞后,细胞变圆、皱缩甚至崩解；而给予姜黄素预处理的RAW264.7细胞形态正常,细胞间仍有连接融合。结论：棕榈酸可诱导RIP140、TNF-α、IL-6表达,姜黄素可通过下调RIP140的表达,降低棕榈酸诱导的炎症因子释放,减轻巨噬细胞炎症反应。目的：游离脂肪酸浓度升高增加了巨噬细胞炎症浸润,从而干扰胰岛素信号途径,引发胰岛素抵抗以及β细胞功能障碍。RlP140能与NF-κB途径共激活,促进TNF-α、L-6等炎症因子的转录。本研究探讨棕榈酸(palmitate, PA)作用下RIP140对小鼠胰岛β细胞炎症浸润的影响及其机制。方法：巨噬细胞RAW264.7分组：BSA组(不转染,加入与棕榈酸等体积BSA处理24h)、PA组(不转染,加入500μmol/L棕榈酸处理24h)、pEGFP-N1+PA组(转染pEGFP-N1质粒24h后,加入500μmol/L棕榈酸处理24h)、pEGFP-N1-RIP140+PA组(转染pEGFP-N1-RIP140质粒24h后,加入500μmol/L棕榈酸处理24h)、scramble siRNA+PA组(转染scramble siRNA24h后,加入500μmol/L棕榈酸处理24h)、RIP140siRNA+PA组(转染RIP140siRNA24h后,加入500μmol/L棕榈酸处理24h),收集上清测定TNF-α、IL-6浓度,收集细胞测定TNF-α、IL-6mRNA表达;加入新鲜的培养液继续培养24h,收集条件培养液用于刺激MIN6细胞,24h后收集MIN6细胞,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测早期凋亡率,ELISA法测定胰岛素分泌,RT-PCR检测PGC-1α、UCP2、 iNOS1、PDX-1、PEPCK和PCNA mRNA水平,Western检测JNK和ERK1/2磷酸化水平。MIN6细胞分组方法与RAW264.7相同,处理结束后收集细胞上清用于RAW264.7细胞及原代腹腔巨噬细胞的趋化实验。结果：1)pEGFP-N1-RIP140+PA组巨噬细胞释放的TNF-α、IL-6较pEGFP-N1+PA组明显增加(P<0.01),而RIP140siRNA+PA组巨噬细胞分泌的TNF-α、IL-6较scramble siRNA+PA组显著减少(P<0.01)2)与pEGFP-N1+PA组条件培养液刺激的MIN6细胞相比,pEGFP-N1-RIP140+PA组条件培养液刺激的MIN6细胞24h、48h细胞增殖活性下降(均P<0.01)早期凋亡增加(P<0.01),胰岛素分泌减少(P<0.01),且PGC-1α、PEPCK、 PCNA mRNA表达下降(分别为P<0.05,P<0.05,P<0.01),而UCP2、iNOS1以及PDX-1mRNA表达上调(分别为P<0.01,P<0.01,P<0.05),JNK和ERK途径被激活(均P<0.01)：与scramble siRNA+PA组条件培养液刺激的MIN6细胞相比,RIP140siRNA+PA组条件培养液可增加MIN6细胞24h、48h细胞增殖活性(均P<0.01),减少早期凋亡细胞(P<0.01),增加胰岛素分泌(P<0.01),增加PGC-1α、PEPCK、PCNA mRNA表达(分别为P<0.01,P<0.05,P<0.01),下调UCP2、iNOS1以及PDX-1mRNA表达(分别为P<0.01,P<0.01,P<0.05),减少JNK和ERK途径的激活(均P<0.01)。3)棕榈酸作用下上调MIN6细胞RIP140, RAW264.7细胞及小鼠腹腔原代巨噬细胞趋化作用增加(均P<0.01),而棕榈酸作用下下调MIN6细胞RlP140,RAW264.7细胞及小鼠腹腔原代巨噬细胞趋化作用下降(均P<0.01)。结论：高浓度脂肪酸作用下,巨噬细胞R1P140通过调控炎症因子转录,介导巨噬细胞对胰岛p细胞炎症浸润,损伤p细胞功能,这可能涉及JNK和ERK1/2途径的激活以及特定基因的表达改变。高浓度脂肪酸作用下,胰岛β细胞RIP140介导TNF-α、IL-6表达,增加巨噬细胞趋化作用,介导局部炎症反应。