论文部分内容阅读
丹皮酚是在药用植物牡丹皮中提取出的一种小分子酚类化合物,已有文献报道其具有抗肿瘤作用,而钙粘素是近年来发现的与肿瘤的发生与发展有紧密联系的一类糖蛋白。我们首先对丹皮酚与钙粘素相互作用进行探索实验,发现二者能够产生显著作用。在此基础上查阅相关文献,进一步试验了从植物中提取出来的、具有良好药用活性的植物多酚类物质原花青素及其单体儿茶素,对它们与钙粘素相互作用方式和形成的结构进行了探索性的研究。 本研究主要内容包括:⑴运用紫外光谱法、荧光光谱法和原子力显微镜技术对丹皮酚与钙粘素相互作用进行探索实验。荧光光谱实验结果表明丹皮酚对钙粘素的荧光具有显著地猝灭作用且猝灭方式符合静态猝灭机制。丹皮酚与钙粘素形成复合物的热力学参数分别为△H=-4.3×105 J·mol-1和△S=-1.3×103 J·mol-1·K-1,表明丹皮酚与钙粘素的结合过程以氢键和范德华力为主。原子力显微观察结果显示钙粘素分子间可形成有序长链结构,丹皮酚加入后能显著破坏这种组装结构而形成短链结构,这是由于丹皮酚与钙粘素末端色氨酸残基的作用而影响相邻钙粘素分子结构域间的交错作用所致。⑵在原花青素与钙粘素的相互作用分析研究中,圆二色光谱实验结果表明原花青素作用钙黏蛋白后使其β-转角和β-折叠结构比率显著增加进而引起钙黏蛋白二级构象的变化。荧光光谱法研究结果表明原花青素能够显著地猝灭钙粘素的荧光,通过猝灭常数随温度变化趋势推断为静态猝灭过程。原花青素与钙粘素形成复合物的热力学参数分别为△H=-2.0×104J·mol-1和△S=35 J·mol-1·K-1,表明原花青素与钙粘素结合过程中以疏水作用力为主。原子力显微观察结果显示钙粘素分子间可形成有序长链结构,原花青素加入后与钙粘素分子产生相互作用从而打破这种组装结构而形成短链结构。⑶选取原花青素的结构单体儿茶素与钙粘素的相互作用进行对比实验。荧光光谱法研究结果表明儿茶素与钙粘素的猝灭机制、分子间力的作用方式均与原花青素相同。在相同温度条件下儿茶素与钙粘素的结合常数要小于原花青素与钙粘素的结合常数值;此外高分辨原子力显微观察结果显示儿茶素加入能影响相邻钙粘素分子结构域间的交错作用从而使链状结构分解为低聚体。对比荧光光谱和 AFM实验结果来看,原花青素与钙粘素的作用强度大于其结构单体儿茶素。