刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是人兽共患弓形虫病的病原，可寄生在包括人在内的200多种动物的有核细胞内，严重危害人体健康且给全世界畜牧业造成很大的经济损失。弓形虫病流行范围广，全世界有1/4人口受到威胁，平均血清阳性率为25％～50％，甚至可高达85％以上。数据显示，养猫、犬人群感染率显著高于不养猫、犬人群。而我国猫弓形虫感染率平均在15.16％～73％之间，犬感染率在3.69％～33％，是弓形虫病传播的主要传染源之一。 本论文采用ELISA方法对广州市猫、犬进行了弓形虫病血清流行病学调查，对来自广州市的206只猫、150只犬血清进行弓形虫IgG抗体检测结果显示，广州市猫和犬弓形虫血清阳性率分别为25.24％和21.33％。与以前的调查结果相比，家养猫、犬感染率有所降低，但流浪猫、犬保持着较高的感染率，应引起足够的重视。 传统弓形虫虫株分离方法仅是将所采集的病料经研磨加双抗等简单处理即接种小白鼠盲传分离虫株，分离效率偏低，且费时、工作量大。本实验将感染动物的组织用盐酸-胃蛋白酶溶液消化处理，制作组织悬液接种小白鼠分离弓形虫株。通过盐酸-胃蛋白酶的消化作用，可以促使囊壁溶解释放出缓殖子，更容易感染小白鼠，从而提高分离效率。本实验从24只来自广州的猫组织样品中成功分离出8株弓形虫虫株，分离率高达33.33％，说明胃蛋白酶消化、小白鼠接种是分离弓形虫虫株的一种较为理想的方法。 为进一步了解弓形虫群体遗传学，并为疫苗研究及对基因型和疾病模式之间潜在的相关性研究等提供重要的依据，本文应用序列相关扩增多态性(sequence-related amplified polymorphism，SRAP)和微卫星锚定PCR(Simple sequence repeat-anchored polymerase chain reaction amplification，SSR-PCR)两种方法分别对来自我国广州的弓形虫虫株进行基因组DNA多态性研究，旨在从基因水平上明确我国弓形虫的遗传变异水平，并对SRAP和SSR-PCR两种方法在弓形虫分子遗传学研究上的应用进行评价。两种方法都利用PCR的灵敏性对弓形虫进行DNA多态性扩增、琼脂糖以及6％变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测。根据扩增带型和UPGMA树状图的遗传关系分析，可以将分离自广州市不同宿主个体的弓形虫虫株区分为强毒、弱毒两个群体，同时也显示了各虫株个体之间存在遗传差异。 本项研究调查了广州市猫、犬弓形虫病流行情况，成功地从猫体内分离出8株弓形虫虫株，并评价了SRAP和SSR-PCR在弓形虫分子遗传学分析上的应用，为弓形虫的种群遗传分析、鉴别诊断以及弓形虫病的防治等更为深入的研究奠定了基础。其中SRAP技术用于弓形虫遗传变异的研究在国内外尚属首次，研究结果表明SRAP方法是一种具有操作相对简便、多态性高、重复性和稳定性好等优点的分子标记。