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红细胞(red blood cell, RBC)输注效果与红细胞保存质量有着密切的关系。针对红细胞保存质量难以再提高的问题,有研究结果显示,给保存期长的红细胞补充一氧化氮(nitric oxide, NO)可以明显改善红细胞的变形性及输注后效果。本实验室在前期研究的基础上,推测NO可能通过某些特定细胞群的作用来提高整体红细胞保存质量。目的：研究外源性NO药物供体硝普钠(sodium nitroprusside, SNP)和前体L-精氨酸(L-arginie, L-arg)对红细胞不同保存时期质量的影响,且探究NO与红细胞糖酵解代谢的关系以此来阐明NO作用于红细胞的部分机理。方法：密度梯度离心法分离已孵育1h不同浓度的SNP和L-arg的红细胞,通过检测红细胞变形性和渗透脆性来分别确立SNP和L-arg的最佳添加浓度。在不同保存时期添加最佳浓度的NO的红细胞经密度梯度分离后,检测分层后各层红细胞数目比例、丙酮酸激酶、变形性、渗透脆性等指标。D.L甘油醛(D.L glyceraldehyde, DL-GA)是目前公认的最理想的糖酵解抑制剂,它能特异性抑制丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)和己糖激酶(hexokinase, HK)活性从而达到抗糖酵解的目的。将保存末期的红细胞内分为6组,1组为对照组,2组为D.L甘油醛,3组为SNP,4组为D.L甘油醛加SNP,5组为L-arg,6组为D.L甘油醛加L-arg,孵育2h后密度梯度分离后洗涤2次所得的各层红细胞及未分层红细胞,分别检测变形性、PK、HK活性。结果：保存初期和中期的红细胞在添加10l,M的SNP或L-arg后,其变形性和渗透脆性改善效果明显,末期最佳浓度则为100μM。保存末期的红细胞数目比例在加入NO后2,3层红细胞增加,各层红细胞的天龄也在加入NO后有明显降低,其他指标均发现第4层细胞和保存末期红细胞在加入NO后有明显改善,其他红细胞没有明显的改变或规律性。保存末期的SNP或L-arg能明显提高各层红细胞的变形性、PK和HK活性,在此基础上添加D.L甘油醛能够降低上述指标。结论：保存初期和中期的红细胞SNP和L-arg的最佳浓度均为10μM,末期最佳浓度为NO仅对老化或保存损伤红细胞的保存质量有明显改善,对年轻红细胞没有规律性作用。NO能通过促进红细胞的糖酵解代谢从而提高红细胞的保存质量。