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本实验旨在研究重组灵芝免疫调节蛋白(recombinant Ganoderma Lucidum immunoregulatory protein ,rLZ-8)诱导人白血病细胞株HL60发生凋亡及其作用机制。在体外实验中,发现rLZ-8可明显抑制HL60细胞增殖,并对其凋亡率进行检测,发现其可诱导HL60细胞发生凋亡。并从形态学观察到rLZ-8可使细胞发生染色质凝集、边缘化和空泡等典型凋亡形态学变化,从而进一步证实凋亡的发生。利用激光共聚焦显微镜对细胞内钙浓度检测发现,rLZ-8可使HL60细胞内钙明显增高。为了明确其作用位点,将FITC与rLZ-8偶联后进行亚细胞定位检测。结果提示细胞核可能是rLZ-8发挥作用的位点之一。通过对线粒体膜电位,细胞色素C,caspase-3,9,12及相关基因TR3、Bcl-2和Bax检测,提示线粒体通路是rLZ-8诱导HL60细胞凋亡的通路之一。基因芯片是一种能快速检测大量基因表达的分子生物学研究工具,20世纪90年代初期人类基因组计划和分子生物学相关学科的发展为基因芯片技术的出现和发展提供了有利条件。通过对人全基因组芯片及蛋白免疫印迹实验检测,分析rLZ-8作用HL60细胞的分子机制和作用通路。将生物信息学与芯片结果综合分析,MAPK通路在rLZ-8诱导HL60细胞凋亡的作用中起着一定作用。因此,提示rLZ-8诱导HL60细胞发生凋亡的作用机制可能是线粒体通路及p38MAPK通路共同作用的结果。本实验的创新之处在于:首次从细胞凋亡角度探讨了rLZ-8对白血病细胞HL60的作用机制,并将形态学检测,亚细胞作用位点和基因芯片这一大规模、高通量的检测技术相联系,利用生物信息学综合分析了蛋白诱导白血病细胞凋亡的作用通路,并为rLZ-8诱导白血病细胞凋亡机制的进一步研究提供了新的线索。