昆虫是陆地上种类最多、数量最大和分布最广的一类生物。在长期的自然演化过程中，昆虫形成了蜕皮与变态这样一种特殊而重要的发育特征。　　 在昆虫的生长、蜕皮和变态及生殖等发育过程中，蜕皮激素(Ecdysone)和保幼激素(Juvenile hormone，JH)发挥了重要的调控作用。目前，蜕皮激素调控昆虫生长发育的分子机制已经比较清楚，参与蜕皮激素信号传导的受体和其他级联调控因子相继被鉴定。而JH的分子作用机制尚不清楚，目前己发现: USP、MET、GCE、BR-C、FKBP39、Chd64、Kr-h1、SRC和FISC可能参与了JH的早期信号传导途径，其中，MET被认为是JH的受体，受到越来越多的重视。　　 家蚕（Bombyx mori）是一种重要的经济昆虫，也是鳞翅目昆虫研究的模式生物。本文以家蚕为研究材料，对可能参与JH信号途径的两个基因FKBP39和Chd64进行了克隆，分析了它们的表达及在JH信号传导途径中的作用，获得的主要结果如下:　　 (1)家蚕BmFKBP45和BmChd64基因的克隆及结构分析　　 家蚕BmChd64基因全长cDNA为567bp，编码188aa，不含内含子，含有CH结构域;BmFKBP45基因存在三种构型，我们分别命名为BmFKBP45-L、BmFKBP45-M和BmFKBP45-S，长度分别为1209bp、804bp和492bp，分别编码402aa、267aa口163aa，其中BmFKBP45-L和BmFKBP45-M含有FKBP_C结构域，而BmFKBP45-S缺失了这个结构域。这几个蛋白都是亲水性蛋白，存在多个磷酸化位点，且都存在核定位信号。　　 (2)家蚕BmFKBP45和BmChd64基因的时空表达特征　　 采用semi-quantitative-RT-PCR和Real-time PCR方法，分析了这两个基因在家蚕5龄幼虫期、蛹期及成虫期不同组织中的表达。结果表明，这两个基因在5龄幼虫期、蛹期及成虫期不同组织中都有表达。在翅原基中的表达变化与家蚕体内JH的滴度变化规律相一致。　　 (3)家蚕BmFKBP45和BmChd64基因表达与JH的关系　　 分析了JH对这两个基因表达的诱导作用。结果显示，外源JH处理并不能诱导这两个基因在幼虫中的表达;但JH处理离体培养的细胞，抑制了两个基因的表达。　　 (4)家蚕BmFKBP45和BmChd64重组蛋白表达及抗体制备　　 通过原核表达系统获得了BmChd64、BmFKBP45-M和BmFKBP45-M重组蛋白。利用重组的蛋白制备了BmChd64和BmFKBP45-M多克隆抗体，抗体能很好地专一地识别相应的蛋白抗原。　　 (5) BmFKBP45和BmChd64蛋白相互作用分析　　 利用Far-western blot方法，初步分析了BmChd64和BmFKBP45-M蛋白的相互作用。结果显示，这两个蛋白不存在相互作用。　　 (6) BmFKBP45和BmChd64亚细胞定位分析　　 为了进一步了解蛋白的功能，对这几个蛋白的亚细胞定位进行了分析。结果表明，BmFKBP45-S分布在细胞核中，BmChd64在细胞核和细胞质中都有分布，但主要分布在细胞核中。这些结果暗示这两个蛋白主要是在细胞核中发挥调控下游基因的调控表达的作用。