鸡包涵体肝炎(chicken inclusion body hepatitis, IBH)是由禽腺病毒引起的一种世界范围内的急性传染病。主要发生于3-7周龄的肉鸡,是由多种不同血清型的禽腺病毒引起的,可与其它的细菌病毒继发或并发感染。禽腺病毒属于禽腺病毒科禽腺病毒属的成员,目前为止人们发现有12个血清型的禽腺病毒与鸡包涵体肝炎相关。其中与自然爆发的包涵体肝炎相关的血清型至少有10个。2型、3型、4型、5型、6型、7型和8型为引起鸡IBH的主要血清型。自然爆发的鸡包涵体肝炎的特点为：病鸡突然死亡,感染后3-4天为高峰期,5天后恢复正常,但有时会持续2-3周。主要表现为：严重贫血、肝脏肿大出血和坏死灶、黄疸、肝细胞核内可见包涵体。我国于1976年首先在台湾省发现该病,此后在江苏省、湖南省、吉林省、辽宁省、河南省和内蒙古都相继发生,呈日益蔓延趋势。鸡包涵体肝炎给世界范围内的养禽业带来了重大的损失。斑点杂交技术简单的操作以及较低的成本是检测此病理想的选择。鸡禽腺病毒的最佳分离培养物是鸡胚,经由卵黄囊接种后,胚胎可于2-7天内死亡,在肝细胞中常可见嗜碱性核内包涵体,其细胞核可较正常大2-3倍。将各血清型标准毒株通过鸡胚卵黄囊接种对其进行增殖培养,从NCBI GenBank数据库中禽腺病毒血清型3、5、6、7、9、10、11六邻体蛋白基因的标准序列里,找出保守性序列和血清型之间同源性低的序列,用此段序列来设计7对引物。分别提取增殖的病毒的DNA,并进行PCR扩增,得到相应大小的目的产物,目的条带经切胶回收定量后,用地高辛标记即为包涵体肝炎病毒核酸探针,将探针进行灵敏度检测后,可以得出探针的最小检出量均达到5pg。通过特异性检测可知各血清型探针之间不存在交叉反应。建立斑点杂交的检测方法,并用于检测山东、江苏、河南部分地区采集的病料,上述各地区均检出阳性病鸡。通过实验,并结合师兄师姐前面所监测的其他5种血清型,表明了鸡包涵体肝炎病的普遍流行,其中以血清2、3、4、5、6、7、8型腺病毒的流行较为普遍,同之前的流行病学调查结果是一致的。本实验建立的斑点杂交诊断方法有较高的灵敏度和良好的特异性,通过建立的斑点杂交诊断方法可以对阳性病料进行检测,可用于生产中实验室的诊断以及检测。