富含血小板血浆(PRP)在口腔种植体骨结合中的应用

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目的探讨与评估富含血小板血浆在种植体周骨缺损区对骨再生及种植体-骨结合的影响。方法采用Curasan-type PRP Rit两次离心法,从狗后肢抽静脉血6ml,以1500r/min转速离心20min,可见血液分三层,最底层是沉降系数较大的红细胞层,最上层是血清,交界处为含血小板的一薄层,吸取上部血浆及靠近交界面下1mm的红细胞转到另一试管中,再以2000r/min转速离心10min,可见在底部薄层的红细胞上沉积有棕色物质,即为血小板沉积层,用巴氏管吸取上部大部分血浆,剩下约0.5ml摇匀即PRP,在PRP加入0.1ml激活剂(1000u牛凝血酶和1ml10%Cacl2溶液混合而成),约3-5分钟后即成凝胶状即PRP胶,放在无菌器皿中备用。在6只成年杂种狗双侧下颌骨下缘各植入2颗纯钛种植体(共24颗)并在种植体周造成缺损,右下颌2颗为对照组,在缺损处填入磷酸三钙和生理盐水的混合物,左下颌2颗为实验组,在缺损处填入磷酸三钙和富血小板血浆的混合物。术后4、8、12周分别处死两只狗,先后行X线片观察、骨密度测量、电镜观测和组织学观察。结果X片观测及骨密度测定:4、8、12周时均示实验组骨缺损区新生骨密度比对照组高;电镜观测:4、8、12周时均示实验组和对照组种植体骨结合率有显著性差异,实验组种植体骨结合率高;组织学观察:实验组可见大量成骨细胞、骨细胞及新生骨小梁,新生骨组织较成熟,对照组成骨细胞少,骨小梁细而少,纤维组织多见。结论(1) PRP促进种植体周骨缺损区新骨形成。富血小板血浆可释放多种生长因子,在刺激成骨细胞和前成骨细胞的增殖、抑制破骨细胞的形成和骨吸收、增加胶原蛋白合成的能力、诱导新生血管形成、为局部骨再生及代谢提供有利的微环境中单独或共同发挥了作用。基于上述各种生长因子的生物学特性及PRP自身的纤维网状支架作用,赖于环境中的骨髓干细胞、OB(osteoblast)等成骨相关细胞,具备了组织工程的三要素,经过一定时间后,如实验结果所示促进骨缺损区新骨形成。(2)PRP促进种植体骨结合。PRP促进种植体骨结合,这是因为在种植体骨结合过程的每一阶段都发挥了它独到的作用。在早期种植体表面的细胞粘附过程中,PRP本身是浓缩的血液,可以充分提供某些蛋白质大分子,以便在种植体表面形成稳定的蛋白质涂层;在种植体表面细胞的增殖与分化过程中,PRP充分发挥了诱导作用;在种植体表面形成接触成骨,与骨组织表面接触成骨共同形成骨结合(3)PRP缩短了种植体骨结合时间。由于PRP明显促进种植体周骨缺损区新骨形成、促进种植体骨结合,因而缩短了种植体骨结合时间。
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