【摘 要】
：
小鹅瘟病毒（Gosling plague virus,GPV）、新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）、鹅星状病毒（Goose Astrovirus,GAst V）、呼肠孤病毒（Avian reovirus,ARV）、坦布苏病毒（Tembusu virus,TMUV）是分别引起小鹅瘟、新城疫、鹅痛风、鹅出血性坏死性肝炎、鹅产蛋下降综合征的病原。上述5种病毒可经卵垂直传
【基金项目】
：
新疆维吾尔自治区重点研发计划项目“鹅产业安全高效生产关键技术集成与示范”,（项目编号: 2020B01004-2）,的部分研究成果,课题主持人:刘建华副教授,（新疆农业大学动物医学学院）；
论文部分内容阅读
小鹅瘟病毒（Gosling plague virus,GPV）、新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）、鹅星状病毒（Goose Astrovirus,GAst V）、呼肠孤病毒（Avian reovirus,ARV）、坦布苏病毒（Tembusu virus,TMUV）是分别引起小鹅瘟、新城疫、鹅痛风、鹅出血性坏死性肝炎、鹅产蛋下降综合征的病原。上述5种病毒可经卵垂直传播,在引入种蛋时,有携带病原的风险。雏鹅感染致死率高,造成巨大的经济损失,严重威胁鹅产业的发展。为能够检测新疆地区鹅上述5种病毒,本研究拟建立GPV、NDV、GAst V、ARV、TMUV多重PCR检测方法。参照Gen Bank中GPV、TMUV、GAst V、ARV和NDV基因序列,针对保守区域分别设计特异性引物,构建阳性质粒,建立5种病毒单项PCR检测方法;以单项PCR方法为基础,优化多重PCR反应条件,分析其灵敏性、特异性和重复性,并对临床样品进行检测。结果表明,建立的多重PCR检测方法退火温度、引物浓度分别在56～58℃、0.8～1.2μm/L间效果最佳,与禽流感病毒、禽痘病毒、鸡传染性支气管炎病毒无交叉反应,GPV、TMUV、GAst V、ARV和NDV的检测下限分别为:8.6×10 copies/μL、4.4×10~3 copies/μL、8.3×10~3 copies/μL、3.3×10~3 copies/μL以及8.8×10~3 copies/μL,且重复性较好。和田地区某鹅场临床样品GPV、GAst V和NDV的阳性检出率分别为74.29%（26/35）、2.86%（1/35）、20.00%（7/35）,其余未检出;另外,GPV和NDV混合感染检出率为14.29%（5/35）。利用建立的多重PCR方法检测和田地区某鹅场肝组织样品,将处理后的单纯感染组织液接种鸭胚,盲传三代;设计GPV结构蛋白（VP）基因特异性引物,收集尿囊液并进行PCR扩增,构建克隆载体,分析VP1、VP2、VP3基因核苷酸相似性及亲缘关系,并预测VP蛋白高级结构。PCR结果显示,从鸭胚尿囊液中检测到GPV,将其命名为GPV/Goose/XJHT/2020。该毒株对鸭胚有致病性。VP基因序列分析结果表明,该毒株与强毒株DY16、RC16相似性99%以上,亲缘性高且处在同一分支;其与疫苗株（SYG61v）弱毒株GPV 98E相似性为95%,亲缘性较低且处在不同分支。VP蛋白二级结构预测结果显示,其具有较好免疫原性。综上所述,本研究建立了灵敏性高、特异性强、重复性好的GPV、TMUV、GAst V、ARV和NDV多重PCR检测方法,应用其从和田地区某鹅场检测出GPV感染,并进行了病毒VP基因遗传进化分析。本研究为新疆地区鹅场上述5种鹅病毒病的快速、简便检测、诊断提供了方法,并为揭示新疆地区鹅场GPV的流行规律提供实验数据。
其他文献
2020年1月,新冠疫情的出现出乎所有人的意料,同时,它对于美术教育机构造成了巨大的打击。由于疫情期间没有收入来源,大量美术机构无力支撑运营压力直接倒闭。F美术教育机构在疫情初期就采取合理的应对措施,为各门店在疫情期间挽回损失。2021年7月,由中共中央办公厅和国务院办公厅颁布的“双减”政策,为素质机构带来了更多的机遇与挑战。已经经营十余个年头的F美术教育机构,全国各地开设了500多家门店,在幼儿
河鲈（Perca fluviatilis）隶属于硬骨鱼纲（Osteichthyes）、鲈形目（Perciformes）、鲈科（Percidae）、鲈属（Perca）,在我国分布于额尔齐斯河和乌伦古湖水域。近年来,由于人为破坏、生态环境改变等多种因素,河鲈野生群体数量正在逐步减少,乌伦古湖的河鲈几乎频临灭绝。本研究利用形态学和分子生物学方法,对寄生在河鲈鳃上的锚首虫进行了种类鉴定、系统发育分析和感染
乡村形象是中国形象的重要组成部分,传递乡村形象、讲好乡村故事对国家形象塑造具有重要意义,在美丽乡村政策不断深化的当下尤显重要。纪录片以纪实这一最大特点成为反映客观实在、建构乡村形象的一大手段,对其进行研究既可以了解“美丽乡村”视域下纪录片中乡村形象呈现出何种样貌,以此窥探变化背后的规律性因素,从而发现纪录片形象创作中的问题,促进其优化改善。本研究以乡村形象为切入口,以“美丽乡村”提出至今这一时间段
为探讨绵羊尾脂进化机制,本研究以巴什拜羊（肥尾型）作为对照,盘羊与巴什拜羊杂交二代（瘦尾型F2羊）作为研究对象,对其尾部组织进行全转录组测序,采用q RT-PCR验证测序结果;通过生信分析筛选出差异表达miRNAs和lncRNAs及其所参与的信号通路,随后选出脂肪沉积相关的4个miRNAs（miR-24-3p、miR-29a、miR-30b、miR-193b-3p）和4个lncRNAs（MSTRG
杨树和柳树因生态适应性强等特点,成为了新疆重要的生态林和商品林树种。然而,随着林木腐烂病在新疆林木上的大面积发生,制约了以杨树和柳树为主要树种的防护林的生态和经济效益。新疆现有关于腐烂病的研究多聚焦于特色果树上,而以杨树和柳树为主要树种的生态防护林上的腐烂病研究较少,针对新疆杨树和柳树上该类真菌的生物学特性及致病性的分化情况缺乏系统研究。本研究对新疆杨树和柳树上壳囊孢属真菌在各地区的分布情况进行统
棘球蚴病也被称之为包虫病,是一种重要的人兽共患病,由带科棘球属绦虫的幼虫引起,遍布于世界各地;其中大多数由细粒棘球蚴和多房棘球蚴引起,包虫病对人体健康和全球畜牧业的发展构成了极大的威胁。本研究通过制备单克隆抗体的腹水,采用盐析和纯化,得到了纯度较高的单克隆抗体,ELISA法检测单克隆抗体效价,SDS-PAGE凝胶验证抗体纯度;分别对采集的中绦期幼虫与成虫进行形态学鉴定,制备可溶性抗原,应用抗棘球绦
禽流感（avian influenza,AI）是由A型流感病毒引起的禽类的一种呼吸道疾病。禽流感主要的预防和控制手段是疫苗接种。目前广泛使用的流感灭活疫苗,对呼吸道不能诱发有效的黏膜免疫,尽管能抑制病毒在体内的扩散,具有减轻症状的效果。但是疫苗存在的缺陷不容忽视,如鸡胚内培养而导致的抗原变异或被接种者对鸡蛋成分过敏反应等问题,因此需要深入研究开发高效、安全的新型疫苗。病毒样颗粒（Virus-Lik
粪肠球菌作为人和动物体内常在菌,由于其能携带大量移动元件为耐药基因的传播助力,加之其引发感染造成死亡的报道逐年增加,因此本研究以猪养殖场分离的粪肠球菌为切入点,通过琼脂稀释法对新疆阿克苏地区养殖场分离的粪肠球菌进行9大类12种药物的耐药性调查,通过PCR及测序方法进行耐药基因的检测,采用分子分型的手段对其进行亲缘关系分型,并结合接合转移试验对粪肠球菌中多药耐药基因optrA和lsa（E）的传播特点
扁桃（Amygdalus communis L.）由于其独特的风味和价值受到全世界的欢迎,也是世界上重要的经济果树之一。目前,全世界扁桃种植面积达到190万公顷,年产量超过210万吨。然而,扁桃属于配子体自交不亲和性树种,这种遗传机制可以避免自交受精结实,提高其遗传多样性。但是,在扁桃生产上由于存在大量自交授粉现象,造成坐果率低,进而严重降低了扁桃年产量。因此,对扁桃自交不亲和性机制的探究,不仅可
随着我国社会经济的发展和宠物饲养的扩大,宠物医疗水平得到跨越式的发展和迭代。医疗器械的快速发展,使许多人医医疗技术在宠物医疗中开始显露并得到应用。X射线计算机体断层成像技术（CT）由于诊断速度快、准度高、应用广等原因,目前开始在宠物医疗中得到初步的应用和快速的推广。本文对CT的发展和技术进行阐述,测量了犬腹腔主要脏器的正常CT值,对其与犬品种、性别、年龄、体重的相关性进行分析,并整理其在犬脾脏、肾