外源性TGF-β1对骨性关节炎成纤维样滑膜细胞增殖的影响

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目的:观察外源性转化生长因子β1(TGF-β1)对骨性关节炎成纤维样滑膜细胞增殖的影响。 方法:抽取骨性关节炎患者关节液进行体外成纤维样滑膜细胞的分离培养,通过形态学和免疫组化的方法鉴定成纤维样滑膜细胞。传代的第2代纯化成纤维样滑膜细胞分2组,每组分别加入含有低浓度血清(4%V/V)和高浓度血清(15%V/V)DMEM,各组再设8个亚组,空白对照组每孔加入等量的PBS,实验组每孔分别加入终末浓度为1ng/ml、10ng/ml、100ng/ml、125ng/ml、250ng/ml、375ng/ml、500ng/ml的外源性TGF-β1,培养24h、48h、72h后应用MTT法检测每孔0D值。 结果:(1)通过形态学和免疫组化证明培养的细胞为成纤维样滑膜细胞,且纯度较高。(2)外源性的TGF-β1作用24h后,实验组每孔细胞OD值与对照组比较差异不大(P>0.05),48h、72h后低浓度TGF-β1组OD值明显升高(P<0.05),而高浓度TGF-β1组OD值显著降低(P<0.05)。当TGF-β1浓度相同时,不同浓度血清组OD值没有显著差异(P>0.05)。 结论:(1)抽取骨性关节炎病人的关节液可以培养较纯的骨性关节炎成纤维样滑膜细胞。(2)低浓度(1ng/ml-100ng/ml)的外源性TGF-β1作用48h、72h能促进体外培养的成纤维样滑膜细胞增殖,呈量-效关系;高浓度(125ng/ml-500ng/ml)的外源性TGF-β1作用48h、72h能抑制体外培养的成纤维样滑膜细胞增殖。(3)外源性TGF-β1对体外培养的成纤维样滑膜细胞增殖作用受血清浓度影响较小。
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