论文部分内容阅读
邻苯二甲酸酯类(PAEs)的污染对生态系统形成了严重威胁,蚯蚓是土壤生态系统的重要组成部分和类群最大的一类生物,利用蚯蚓作为指示生物来反映土壤污染状况,为合理评价土壤生态安全提供科学依据。本研究选择3种邻苯二甲酸酯类物质(DMP、DEP、DBP),以赤子爱胜蚓(Eisenia foetida)为研究对象,从个体水平,细胞水平和大分子水平研究其毒性效应。同时还以人乳腺癌雌激素受体阳性细胞株MCF-7采用体外试验方法研究了DMP、DEP和DBP的类雌激素效应,弥补了当前关于PAEs的内分泌干扰性能方面资料的不足,为全面评价PAEs化合物的毒性作用提供了科学依据。主要研究结果如下:(1)采用滤纸接触法,研究DMP、DEP对赤子爱胜蚓(Eisenia foetida)的急性毒性效应,实验结果表明:蚯蚓对DMP、DEP两者表现出相似的中毒症状,染毒48h时,DMP的LD5o为129、603μg/cm2, DEP的LD50为145.336μg/cm2。采用自然土壤法研究DMP、DEP对蚯蚓的急性毒性效应,实验结果表明:染毒14d时,DMP的LD5o为1560.120mg/kg, DEP的LD5o为1516.186mg/kg。(2)采用自然土壤法,研究DMP、DEP和DBP对赤子爱胜蚓(Eisen ia foetida)的体重和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的影响,以及蚯蚓体腔细胞溶酶体膜对中性红保留时间(NRRT)的影响。结果表明:随着DMP、DEP和DBP作用浓度加大,暴露时间延长,蚯蚓体重抑制率逐渐升高。DMP. DEP和DBP作用时,CAT活性的时间效应和浓度效应均有显著性变化,SOD酶浓度效应显著但时间效应并不显著,不同浓度的DEP和DBP对蚯蚓组织乙酰胆碱酯酶(AChE)的胁迫效应相似,都表现为先抑制后诱导,并在28d时酶活性恢复到对照组水平或有恢复的趋势。NRRT随着DMP、 DEP和DBP浓度的增大和暴露时间的延长而降低。(3)采用人乳腺癌雌激素受体阳性细胞株MCF-7,通过MTT法检测17,β-E2和DMP、DEP、DBP对细胞活力的影响,并以GAPDH为内参,检测DMP、 DEP、DBP对细胞内几种雌激素受体基因表达的影响。结果表明:10-12-10-6mol/L浓度的17β-E2和10-7~10-3mol/L浓度的DMP、DEP、DBP均能够促进细胞活力上升,其诱导细胞活力最大时的浓度分别为10-9mol/L和10-4mol/L.10-4mol/L、10-5mol/L。DMP.DEP.DBP可以下调细胞中ERα、ERβ和PGRMC1mRNA的表达水平,促使pS2mRNA的表达水平上调,三者均有拟雌激素作用,雌激素效应能力随着碳链延长而增大,具体为DBP>DEP>DMP。