目的:构建CM614-629/I-A^d/IgG2b Fc杆状病毒表达载体,用其感染sf9昆虫细胞,使感染后细胞表达相应的二聚体蛋白。方法:利用RT-PCR从Bal b/c小鼠淋巴细胞中扩增出I-A^dα、I-A^dβ以及IgG2b Fc的目的基因序列,并全基因合成Fos,Jun以及CM614-629抗原肽基因序列;运用重叠PCR将Fos和I-A^dα相连,形成I-A^dα-Fos重组序列;运用重叠PCR将CM614-629、I-A^dβ和Jun的亮氨酸拉链序列相连,形成CM614-629/I-A^dβ-Jun;分别将I-A^dα-Fos、CM614-629/I-A^dβ-Jun和IgG2b Fc插入杆状病毒表达载体pFastBac^TMDual,构建重组载体pFastBac^TMDual+[CM614-629/I-A^d/IgG2b Fc];采用聚合酶链式反应（PCR）及限制性内切酶技术对所构建的载体进行鉴定并测序;将pFastBac^TMDual+[CM614-629/I-A^d/IgG2b Fc]转入DH10Bac感受态,使其在转座子的作用下形成穿梭质粒Bacmid+[CM614-629/I-A^d/IgG2b Fc],利用脂质体转染试剂将重组质粒转染至sf9昆虫细胞,并用P4代病毒大量感染sf9昆虫细胞,收集上清通过PEG20000浓缩可得到CM614-629/I-A^d/IgG2b Fc二聚体融合蛋白,运用双抗体夹心ELISA及Western-blot技术对表达的二聚体蛋白的结构及大小进行检测。结果:PCR及酶切鉴定以及测序结果证实所构建的pFast Bac^TMDual+[CM614-629/I-A^d/IgG2b Fc]重组载体具有正确的序列。双抗体夹心ELISA和Western-blot结果表明重组杆粒病毒能成功感染sf9昆虫细胞,并且表达的融合蛋白具有正确构象。结论:成功构建CM614-629/I-A^d/IgG2b Fc杆状病毒表达载体,并在sf9昆虫细胞中表达,为研究I-A^d限制性的T细胞奠定了基础。