论文部分内容阅读
目的:本课题在前期研究的基础上,通过动物实验进一步深入研究中医温病经典名方甘露消毒丹抗流感病毒的作用机制。本课题研究甘露消毒丹对流感病毒感染小鼠免疫应答的影响,探讨甘露消毒丹防治流感病毒作用与黏膜免疫的相关性,为优化形成流感的中医药防治方案提供科学依据和可行性参考。
方法:将SPF级BALB/c小鼠置于湿热环境下饲养7-14d,建立湿热动物模型。用随机数字表法分为6组,正常对照组:不攻毒,用0.9%氯化钠溶液灌胃,剂量为0.3mL/只,1次/d;病毒模型组:0.9%氯化钠溶液灌胃,剂量为0.3mL/只,1次/d;达菲对照组:达菲水溶液灌胃,剂量为0.3mL/只,甘露消毒丹高、中、低剂量组:甘露消毒丹高、中、低浓度溶液灌胃。除正常对照组外,其余5组以甲型H1N1流感病毒鼠肺适应株UIXD-P18-2(UI182/H1N1)滴鼻造模,攻毒剂量为5LD50,50μL/只。攻毒后连续给药7天。观察小鼠活动状态、体重变化、死亡保护率、肺指数以及肺病毒滴度,并从中选出治疗效果最好的甘露消毒丹有效剂量组进行抗流感病毒的机制实验研究。将SPF级BALB/c小鼠用随机数字表法分为正常对照组、病毒模型组、达菲对照组、甘露消毒丹有效剂量组研究甘露消毒丹抗流感病毒的机制。用ELISA检测小鼠鼻咽灌洗液SIgA、小鼠支气管肺泡灌洗液SIgA、肠道灌洗液SIgA、小鼠血清中抗体IgA表达水平。
结果:
1.病毒模型组的死亡率为100%;达菲对照组、甘露消毒丹高剂量组死亡保护率和生命延长率均为100%、55.56%;甘露消毒丹低剂量组死亡保护率和生命延长率为80.00%、45.56%;甘露消毒丹低剂量组死亡保护率和生命延长率为60.00%、35.56%,达菲对照组、甘露消毒丹低、中、高剂量组的保护率明显高于病毒模型组(P<0.01)。
2.各组小鼠各时间点体重保护率均低于正常对照组,具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与病毒模型组比较,各组小鼠各时间点体重保护率明显较高(P<0.05或P<0.01)。
3.病毒模型组与正常对照组肺指数相比具有显著差异,证明模型建立成功。达菲对照组与甘露消毒丹低、中、高剂量组第3天与第6天的肺指数明显高于正常对照组(P<0.05)。达菲对照组、甘露消毒丹低、中、高剂量组第3天与第6天的肺指数明显低于病毒模型组(P<0.05或P<0.01)。甘露消毒丹高剂量组肺指数抑制率高于甘露消毒丹中、低剂量组,低于达菲对照组。
4.达菲对照组和甘露消毒丹低、中、高剂量组第3天、第6天肺组织病毒滴度均高于正常对照组(P<0.05),达菲对照组和甘露消毒丹低、中、高剂量组第3天、第6天肺组织病毒滴度均低于病毒模型组(P<0.05或P<0.01)。
5.甲型H1N1流感病毒感染后,甘露消毒丹有效剂量组和达菲对照组第3天、第6天小鼠鼻咽灌洗液、支气管肺泡灌洗液和肠道灌洗液SIgA表达水平明显明显低于正常对照组(P<0.05或P<0.01),明显高于病毒对照组(P<0.05或P<0.01)。
6.甲型H1N1流感病毒感染后,甘露消毒丹有效剂量组(即甘露消毒丹高剂量组)和达菲对照组第3天、第6天小鼠血清中IgA表达水平明显低于正常对照组(P<0.05或P<0.01)。与病毒对照组比较,甘露消毒丹有效剂量组和达菲对照组第3天、第6天小鼠血清中IgA表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01)。
结论:
1.甘露消毒丹对流感病毒感染小鼠具有生命保护作用。在致死剂量甲型H1N1流感病毒UIXD-P18-2(UI182/H1N1)感染小鼠的情况下,甘露消毒丹各剂量组对小鼠的死亡保护率均大于50%,且高剂量组对小鼠的死亡保护率为100%。
2.甘露消毒丹能抑制流感病毒所致小鼠的肺损伤。在致死剂量流感病毒感染小鼠的情况下,甘露消毒丹各剂量组能有效降低小鼠肺指数、肺指数抑制率以及肺内病毒滴度,具有明显的体内抗病毒效果。
3.甘露消毒丹防治流感病毒感染与黏膜免疫具有相关性。甘露消毒丹能增加感染甲型H1N1流感病毒小鼠鼻咽灌洗液、支气管肺泡灌洗液、肠道灌洗液中SIgA和血清中的IgA分泌。证明甘露消毒丹能通过呼吸道、肠道黏膜免疫系统激发共同黏膜系统进而影响全身免疫系统,发挥抗流感病毒作用。
方法:将SPF级BALB/c小鼠置于湿热环境下饲养7-14d,建立湿热动物模型。用随机数字表法分为6组,正常对照组:不攻毒,用0.9%氯化钠溶液灌胃,剂量为0.3mL/只,1次/d;病毒模型组:0.9%氯化钠溶液灌胃,剂量为0.3mL/只,1次/d;达菲对照组:达菲水溶液灌胃,剂量为0.3mL/只,甘露消毒丹高、中、低剂量组:甘露消毒丹高、中、低浓度溶液灌胃。除正常对照组外,其余5组以甲型H1N1流感病毒鼠肺适应株UIXD-P18-2(UI182/H1N1)滴鼻造模,攻毒剂量为5LD50,50μL/只。攻毒后连续给药7天。观察小鼠活动状态、体重变化、死亡保护率、肺指数以及肺病毒滴度,并从中选出治疗效果最好的甘露消毒丹有效剂量组进行抗流感病毒的机制实验研究。将SPF级BALB/c小鼠用随机数字表法分为正常对照组、病毒模型组、达菲对照组、甘露消毒丹有效剂量组研究甘露消毒丹抗流感病毒的机制。用ELISA检测小鼠鼻咽灌洗液SIgA、小鼠支气管肺泡灌洗液SIgA、肠道灌洗液SIgA、小鼠血清中抗体IgA表达水平。
结果:
1.病毒模型组的死亡率为100%;达菲对照组、甘露消毒丹高剂量组死亡保护率和生命延长率均为100%、55.56%;甘露消毒丹低剂量组死亡保护率和生命延长率为80.00%、45.56%;甘露消毒丹低剂量组死亡保护率和生命延长率为60.00%、35.56%,达菲对照组、甘露消毒丹低、中、高剂量组的保护率明显高于病毒模型组(P<0.01)。
2.各组小鼠各时间点体重保护率均低于正常对照组,具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与病毒模型组比较,各组小鼠各时间点体重保护率明显较高(P<0.05或P<0.01)。
3.病毒模型组与正常对照组肺指数相比具有显著差异,证明模型建立成功。达菲对照组与甘露消毒丹低、中、高剂量组第3天与第6天的肺指数明显高于正常对照组(P<0.05)。达菲对照组、甘露消毒丹低、中、高剂量组第3天与第6天的肺指数明显低于病毒模型组(P<0.05或P<0.01)。甘露消毒丹高剂量组肺指数抑制率高于甘露消毒丹中、低剂量组,低于达菲对照组。
4.达菲对照组和甘露消毒丹低、中、高剂量组第3天、第6天肺组织病毒滴度均高于正常对照组(P<0.05),达菲对照组和甘露消毒丹低、中、高剂量组第3天、第6天肺组织病毒滴度均低于病毒模型组(P<0.05或P<0.01)。
5.甲型H1N1流感病毒感染后,甘露消毒丹有效剂量组和达菲对照组第3天、第6天小鼠鼻咽灌洗液、支气管肺泡灌洗液和肠道灌洗液SIgA表达水平明显明显低于正常对照组(P<0.05或P<0.01),明显高于病毒对照组(P<0.05或P<0.01)。
6.甲型H1N1流感病毒感染后,甘露消毒丹有效剂量组(即甘露消毒丹高剂量组)和达菲对照组第3天、第6天小鼠血清中IgA表达水平明显低于正常对照组(P<0.05或P<0.01)。与病毒对照组比较,甘露消毒丹有效剂量组和达菲对照组第3天、第6天小鼠血清中IgA表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01)。
结论:
1.甘露消毒丹对流感病毒感染小鼠具有生命保护作用。在致死剂量甲型H1N1流感病毒UIXD-P18-2(UI182/H1N1)感染小鼠的情况下,甘露消毒丹各剂量组对小鼠的死亡保护率均大于50%,且高剂量组对小鼠的死亡保护率为100%。
2.甘露消毒丹能抑制流感病毒所致小鼠的肺损伤。在致死剂量流感病毒感染小鼠的情况下,甘露消毒丹各剂量组能有效降低小鼠肺指数、肺指数抑制率以及肺内病毒滴度,具有明显的体内抗病毒效果。
3.甘露消毒丹防治流感病毒感染与黏膜免疫具有相关性。甘露消毒丹能增加感染甲型H1N1流感病毒小鼠鼻咽灌洗液、支气管肺泡灌洗液、肠道灌洗液中SIgA和血清中的IgA分泌。证明甘露消毒丹能通过呼吸道、肠道黏膜免疫系统激发共同黏膜系统进而影响全身免疫系统,发挥抗流感病毒作用。