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背景与目的： 心脏移植(heart transplantation)是目前治疗各种终末期心脏疾病的有效方法。但心脏移植后的急性、慢性排斥反应一直是阻碍心脏移植广泛应用的最重要因素。已知在移植排斥中，由T细胞介导的细胞毒作用和迟发型过敏反应是主要机制，以细胞肿胀、细胞膜破裂而引起的心肌细胞坏死而引起周围组织的炎症反应是其特点。资料表明，在排斥反应期，细胞既有坏死又有凋亡存在。细胞凋亡是移植后急性排斥期心肌损伤的一个重要机制。已知有多种因素参与心脏移植急性排斥期的细胞凋亡，如氧化应激，自由基等。但有关急性排斥期心肌细胞凋亡的具体机制还未完全阐明。研究表明：在急性排斥期间，细胞凋亡与诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)的表达相一致，提示细胞凋亡有可能通过一氧化氮及过氧亚硝酸盐引起心肌组织损伤。本实验通过建立改良的Ono大鼠心脏腹腔异位移植模型，应用iNOS抑制剂氨基胍(Aminiguanidine，AG)对心脏移植后的实验动物模型进行预处理，观察心肌组织损伤及细胞凋亡，测定移植心脏的iNOS活性情况，从而探讨AG在心脏移植急性排斥期的作用，并寻找抑制细胞调亡的途径，从而延长移植心的存活时间及功能，为临床实践提供理论依据。 材料与方法： 采用成年健康封闭群大鼠，体重在260～300g，平均280±10g。以Wistar大鼠为受体，SD大鼠为供体，建立大鼠腹腔异位心脏移植模型。设A组：Wistar到Wistar大鼠为同系移植对照组，术后每日一次生理盐水1ml皮下注射；B组：郑州大学2姗年硕士毕业论文，创桩移除豁州沂期细胞调亡与诱导型名酥味怡偏(主挑)关系的拟卸院sD到Wista:大鼠为同种移植组对照组，术后每日一次生理盐水Inil皮下注射;C组:AG实验组，术后AG每日一次按lml(600m姚g)皮下注射。各组分别在术后第3，宝7天采集移植心脏，取移植心肌的心室组织。移植心肌标本进行组织病理学检查(按Stanford分级标准，HE染色)及细胞凋亡检测(原位末端标记技术之TUNEL法)和心肌组织中iNOS活性的测定。统计方法: 在微型计算机上用SPSS软件包(10.0版)进行统计学处理。计数资料均以x士S表示，急性排斥反应的组织学分级采用秩和检验;细胞凋亡指数(aPoPtoticindex，Al)及心肌汹05活性检测采用单因素方差分析;以a二0.05为差异显著性的检验标准。结果: 1.移植心肌组织病理学改变 大鼠心脏移植急性排斥反应时的病理学改变的发生发展是从心外膜开始，逐渐向心内膜发展的。A组移植术后直至第7天，移植心肌的组织结构基本正常，心肌间质中仅有少量散在淋巴细胞浸润，各时间点之间无统计学意义(尸=0 .42)。B组第3天移植心脏心肌组织做切片检查，心肌间质中仅少量淋巴细胞浸润，与A组同一时间相比，无统计学意义(尸=0.24)，而到第5天，第7天，B组移植』心脏心肌组织切片中可见心肌间质水肿和灶性心肌坏死，淋巴细胞数量明显增多，第7天尤甚，组内各天比较有统计学意义(P<0 .01);与A组同一时间相比，有统计学意义(P<0 .01)。经AG治疗后，c组移植心脏心肌组织结构破坏减轻，心肌间质中可见散在的淋巴细胞浸润、水肿，无明显的片状心肌坏死，第5天，第7天与B组比较，有统计学意义(尸<0 .05)，与A组相比，亦有统计学意义(P<0 .05)。 2.移植心肌中细胞凋亡情况 将移植心肌心室组织的组织学切片(HE染色)和细胞凋亡〔TUNEL法)切片对照观察，发现各级排斥反应中均可见细胞凋亡的存在，随着心脏移植排斥反应的加重，心肌细胞坏死及凋亡的量也在增加。 3.用iNOs抑制剂AG后，心肌组织病理学改变及iNOS活性情况 术后第3天，A组与B组相比，iNOS活性有统计学意义(尸<0 .01)，C组与郑州大学2哪年硕士毕业论文斥期细胞凋亡与诱导型州翱的聪蔺(i阳S)关系的实验研究B组相比，iNOS活性有统计学意义(P<0 .01)，A组与C组相比，iNOS活性无统计学意义(尸>0 .05)。术后第五天，A组与B组相比，河05活性有统计学意义(尸<0.01)，C组与B组相比，汹05活性有统计学意义〔尸<0.01)，A组与C组相比，iNOS活性无统计学意义(尸>0.05)。术后第7天，A组与B组相比，iNOS活性有统计学意义(尸<0.01)，C组与B组相比，汹05活性有统计学意义(尸<0 .01)，A组与C组相比，汹05活性无统计学意义(p>0 .05)。结论: 1.大鼠心脏移植急性排斥反应时的病理学改变包括:心肌组织内淋巴细胞、单核细胞浸润，心肌坏死，间质水肿。这种病理学改变的发生发展是从心外膜开始的逐渐向心内膜发展，这种现象说明:尽量保持各时间点心肌组织取材部位的一致性，否则造成实验结果的误差。经氨基肌治疗后，上述病理改变显著减轻。 2.大鼠心脏移植急性排斥反应时随着排斥反应的进展，细胞凋亡数明显增多，细胞凋亡亦是大鼠心脏移植急性排斥中组织损伤的重要机制之一。经AG治疗后排斥反应减轻，细胞凋亡数量显著下降。 3.氨基肌通过抑制大鼠心脏移植急性排斥反应期汹05的活性，而抑制细胞凋亡，减轻急性移植排斥期间心肌损伤。 本实验表明:氨基肌