白灵菇(Pleurotusnebrodensis(Inzengae)Quél)是侧耳属的一种重要珍稀食用菌，具有很高食用价值、药用价值、经济价值和生态价值，但是其分子生物学相关研究很少，属内的分类也存在争议。 本研究目的在于建立白灵菇作为一种食用菌的遗传转化体系，它不仅可以促进白灵菇的分类学研究，同时可以建立一种具有潜力的、新型的外源蛋白的表达系统，促进食用菌的遗传育种。本研究以白灵菇为实验菌种，以液体培养的白灵菇菌丝为实验材料，通过溶壁酶酶解获得具有再生活力的原生质体，同时使用含有选择性基因hph(潮霉素抗性基因)的载体pAN7-1和含有目的报告基因gfp(绿色荧光蛋白基因)的载体pBluescript-GFP共转化白灵菇的原生质体，以使得目的报告基因gfp整合到白灵菇基因组中并获得表达。本研究得到以下结果： 1.通过对白灵菇菌丝在平板上生长速率的测定，确定白灵菇原生质体释放的最佳菌龄为7d。 2.建立白灵菇原生质体释放体系。选取了6种原生质体释放稳渗剂，并分别酶解0～3.5h，确定了白灵菇原生质体释放的最佳条件为：以0.6mol／LMgS04为原生质体释放稳渗剂，32℃酶解2.5h。 3.建立白灵菇原生质体的再生体系。选取了5种原生质体再生稳渗剂，并分别选取5种再生浓度，确定了白灵菇原生质体的最佳再生条件为PDSA培养基+1.0mol/L山梨醇，最高再生率为0.75％。 4.建立白灵菇原生质体的转化体系。采用选择性载体pAN7-1和非选择性载体pBluescript-GFP共转化白灵菇的原生质体，获得了具有潮霉素抗性的假定转化子40个，其中一个转化子(PN-8)，经PCR检测、Southern杂交证实目的报告基因gfp已成功的转入白灵菇基因组中，这个转化子在共聚焦显微镜下可以观察到gfp基因表达发出的绿色荧光。 5.转化子能正常出菇，且子实体并无形态改变。通过将获得的转化子白灵菇和非转化的白灵菇分别同时接种出菇培养基进行出菇实验，以白天16℃、晚上6℃的温差刺激白灵菇10d至形成原基，经过3个月的培养，白灵菇转化子和非转化的白灵菇均可正常出菇，且形态相近。