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背景:传统的化学药物治疗由于存在较难避免的药物毒性和达不到理想治疗效果等问题,大大阻碍了其在癌症治疗中的应用。伴随着纳米技术的迅速发展,新型纳米给药系统在提高患者依从性、药物生物利用度、治疗效果上的优势愈来愈显著。其中,超分子聚集型纳米载体作为一种独特的纳米载体形式由于相对简单的制备方法、较高的载药率和十分优异的体内疗效等优点受到极大的关注。方法:1.本研究将硼替佐米(BTZ)、单宁酸(TA)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)结合,通过简便的方法制备了用于治疗乳腺癌的超分子纳米载体BTZ-NP,并通过纳米粒度和Zeta电位仪、透射电子显微镜(TEM)、扫描电镜(SEM)对其粒径、表面Zeta电位、形貌结构和稳定性进行了表征。2.通过氢核磁共振波谱法(1H-NMR)、红外吸收光谱法(IR)、等温滴定量热法(ITC)实验对超分子纳米BTZ-NP合成的机理进行表征,就BTZ和其他两个组分之间的相互作用进行进一步深入探索。3.在不同pH值(pH7.4,pH6.5)的磷酸盐缓冲溶液(PBS)中分别测定BTZ-NP的药物释放曲线。4.将一系列浓度梯度的BTZ-NP溶液以PBS为阴性对照、去离子水为阳性对照,进行体外溶血试验,验证BTZ-NP的安全性。5.以空白超分子纳米载体和游离BTZ为对照,通过细胞摄取实验、MTT实验、透射电子显微镜实验、Calcein-AM/PI活细胞-死细胞双染实验、细胞水平Caspase-3的表达水平来分别评价乳腺癌4T1细胞对BTZ-NP的摄取效果、BTZ-NP在细胞水平上的抗肿瘤作用及其生物相容性。6.构建Balb/c小鼠乳腺癌异种移植模型,通过近红外荧光IVIS?Lumina III小动物活体成像系统、电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定硼元素在体内的分布,以此间接反应BTZ-NP的体内分布情况。7.构建Balb/c小鼠乳腺癌异种移植模型,通过体重和肿瘤生长曲线、瘤重及其图片、Ki-67蛋白和增殖细胞核抗原(PCNA)在肿瘤组织中的表达等评价其疗效。通过血细胞分析、体重变化、苏木精—伊红(HE)染色评估其生物相容性。结果:1.BTZ-NP溶液呈浅蓝色乳光,球形形貌,粒径约为100±40 nm,表面Zeta电位约为-20.0±8.5 mV,具有良好的稳定性。2.BTZ的硼羟基和TA的酚羟基形成了硼酯,TA的酚羟基和PVP的羰基形成氢键,即TA与其他两个组分之间的分子间相互作用促进了超分子BTZ-NP的形成。3.BTZ-NP在微酸环境中较中性条件下释放更快,12h内,前者总释放药量约为70%,后者仅为35%。4.体外溶血实验中各浓度梯度的BTZ-NP均未出现溶血和凝集反应。5.乳腺癌细胞对BTZ-NP的摄取表现出时间依赖性。MTT实验中,抗肿瘤效果以游离BTZ最强,BTZ-NP次之,两者均随BTZ浓度的增加而增加。Calcein-AM/PI活细胞-死细胞双染实验、Caspase-3的表达结果均显示与游离BTZ组相比,BTZ-NP组细胞凋亡略微明显。6.小动物活体成像结果显示,2小时后,BTZ-NP开始在肿瘤组织中逐渐富集,并在随后的24小时达到最大值。ICP-MS实验显示,BTZ-NP在肿瘤部位富集,在心脏中的药物分布减少。7.BTZ-NP治疗组小鼠无显著体重变化,不产生长期毒性,证明其具有良好的安全性和生物相容性。抗肿瘤效果方面,PBS处理的荷瘤小鼠肿瘤生长迅速,BTZ溶液有助于减缓肿瘤的生长,相比之下,BTZ-NP治疗组产生了最令人满意的抗肿瘤效果。结论:超分子纳米BTZ-NP制备简易,结构稳定,呈pH依赖药物释放和肿瘤微环境敏感性,且由于BTZ-NP良好的肿瘤靶向性,该超分子复合纳米材料表现出令人满意的体内外抗肿瘤效果和较低的系统毒性。