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目的： 研究两性霉素B(AmB)作用于人单核细胞白血病细胞(THP-1细胞),在不同浓度及不同时间作用条件下对细胞增殖的影响,对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-8(IL-8)等前炎症因子表达,核因子κB(NF-κB)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)激活的影响. 方法： 以人单核细胞白血病细胞为研究对象,将细胞分为3组,即con组(空白对照)、实验组(终浓度为2、4、8 mg/L两性霉素B处理);阳参组(终浓度为100μg/Lβ-葡聚糖或者100μg/L脂多糖处理).用细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK-8)对人单核细胞白血病细胞进行增殖检测,确定两性霉素B的合适浓度;荧光定量逆转录PCR法测定三组中人单核细胞白血病细胞中TNF-α、IL-8的mRNA表达程度改变.酶联免疫吸附法(ELISA)分析8mg/L AmB作用人单核细胞白血病细胞24小时肿瘤坏死因子-α水平.免疫印迹法(western blot法)分析8 mg/L AmB刺激THP-1细胞后 p38 MAPK和磷酸化 p38 MAPK(p-p38 MAPK)的水平及 NF-κB的抑制蛋白(IκBα)和磷酸化IκBα(p-IκBα)的水平变化.8 mg/L AmB、β-葡聚糖作用人单核细胞白血病细胞16h,以免疫荧光法分析NF-κB(P65)入核情况. 结果： 1.浓度为(2,4,8) mg/L的 AmB刺激人单核细胞白血病细胞在6h、12h、24h细胞增殖率与con组对比无统计学差异(P＞0.05). 2.浓度为2mg/L、4mg/L、8mg/L的AmB作用于人单核细胞白血病细胞6小时,肿瘤坏死因子-αmRNA表达量依次为7.55± 1.17、19.47 ± 2.91、57.22 ± 0.65(与不加刺激的con组比较P＜0.01,P＜0.01,P＜0.01).白介素-8 mRNA表达量依次为2.98± 0.04、5.22 ±1.35、11.82 ± 1.66(与不加刺激的con组比较P＜0.01,P＜0.01,P＜0.01). 3.8mg/L AmB作用于人单核细胞白血病细胞1小时、3小时、6 小时的肿瘤坏死因子-αmRNA表达量依次为8.61± 0.30、10.75± 0.08、56.98 ± 2.43(与不加刺激的con组比较P＜0.01,P＜0.01,P＜0.01),白介素-8 mRNA表达量依次为2.63 ± 0.28、5.35 ± 0.98、11.73 ± 1.18(与不加刺激的con组比较P值分别为P＞0.05,P＜0. 01,P＜0. 01). 4.ELISA法分析8 mg/L AmB刺激人单核细胞白血病细胞24小时肿瘤坏死因子-α蛋白浓度为4039.06±223.87 ng/L,与con组比较有统计学差异,P＜0.001. 5.western blot法分析8 mg/L AmB和THP-1细胞相互作用30分钟磷酸化 p38 MAPK、磷酸化IκBα蛋白表达水平,发现AmB组p-p38 MAPK、p-IκBα蛋白表达水平显著升高. 6.激光共聚焦法观察 NF-κB(P65)入核情况,空白对照组 P65位于细胞质, AmB组及β-葡聚糖组P65出现于核内. 结论： AmB作用于人单核细胞白血病细胞,可出现P38MAPK通路和NF-κB通路激活,肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-8表达程度显著增高,并和两性霉素B作用浓度和时间相关,呈剂量依赖效应和作用时间依赖效应,从而调节固有免疫.