三种不同来源的乳蛋白致敏性强弱研究

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乳制品是八大类致敏食品之一,并且在几种常见的乳中(马乳、牛乳、山羊乳)都含有可以导致乳蛋白过敏的主要过敏原蛋白,他们都会诱导机体发生过敏反应,使肥大细胞释放活性物质。但三种乳蛋白的致敏性强弱还不清楚。为了评价三种乳蛋白致敏性的强弱,本实验通过建立BALB / c小鼠致敏模型来研究三种乳蛋白致敏性的强弱。本研究主要从以下几个方面探讨了三种乳蛋白致敏性的强弱:脾淋巴细胞增殖实验;ELISA方法检测血清IgE水平;利用试剂盒检测血浆中组胺水平;还检测了脾淋巴细胞培养上清中各种细胞因子(IL-5,IL-4,IL-10,IFN-γ)水平;致敏小鼠症状评级以及病理学组织实验。对细胞因子的分泌结果表明,三组乳蛋白对脾细胞上清液中IL-5,IL-4,IL-10和IFN-γ的分泌几乎没有刺激作用;在有ConA存在时,β-lg、牛乳蛋白和羊乳蛋白显著抑制了IL-4,IL-10,IFN-γ,IL-5的分泌,其中马奶组比较PBS组对IL-4,IL-10,IL-5的抑制效果差异显著性最高(P<0.05)。通过淋巴细胞增殖试验来研究三种蛋白的致敏性强弱,不加ConA组数据表明,和马奶组以及PBS阴性对照组相比,β-lg对脾淋巴细胞增殖作用要显著高于这两组(分别为P=0.001,P=0.001),牛奶组和PBS组相比,差异也是极显著的(P=0.002)。牛奶组在任何条件下对细胞刺激作用要远高于马奶组和山羊组。在没有加ConA的情况下,马奶组和羊奶组对细胞刺激的差异性不显著,但在加ConA的情况下,马奶组和羊奶组的差异性显著(P<0.05)。血清中的IgE产生量的结果表明,灌服β-lg小鼠血清中的IgE水平要显著的高于马奶组和PBS组(分别为P=0.02,P=0.005)。马奶组和PBS组差异不显著(P=0.249)。牛奶组和PBS组之间的差异显著(P<0.01)。在三组奶蛋白和β-lg组的差异显著性比较当中,马奶组和β-lg组的差异性显著(P<0.01)。从组胺释放量的角度看,在三组奶蛋白与PBS组差异显著性比较当中,马奶组与PBS组的差异性不显著(P=0.259),羊奶组的差异性显著(P<0.01)。在三组奶蛋白与β-lg组的显著性比较当中,马奶组与β-lg组的差异性显著(P<0.01)从致敏症状评级上来看,灌胃牛奶组的小鼠全身系统性的过敏症状严重度度明显高于其余两组,三组奶蛋白与PBS组差异显著性比较当中,马奶组的差异性不显著,牛奶组的差异性显著(P<0.05)。三组奶蛋白与β-lg组差异显著性比较当中,马奶组的差异性显著(P<0.05),这说明马奶的致敏性要低于羊奶和牛奶的致敏性。在病理学实验当中,牛奶组小肠细胞组织损伤程度较高,其次是羊奶组,最后是马奶组。这表明牛奶当中致敏原会对小肠细胞的组织造成损伤程度要高于其他两组蛋白。创新点:本实验通过建立动物模型来研究三种乳蛋白致敏性的强弱,从血清中IgE水平,血浆组胺水平,细胞因子水平,病理学观察,细胞刺激指数,细胞因子分泌以及致敏症状评级七个方面来研究三种乳蛋白致敏性,从而为信号转导、体液免疫和研发新型低致敏配方奶粉提供了参考。
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