LncRNA-CASC7基因表达下调对胃癌SGC-7901细胞增殖与迁移的影响

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目的:通过生物信息学分析CASC7在胃癌中的表达差异,体外细胞实验进一步探索其对胃癌细胞增殖和迁移的影响,为胃癌的诊断与治疗提供理论依据。方法:1.检索De Map、ICGC公共数据库,下载肿瘤样本中CASC7基因表达数据,通过统计学分析,了解CASC7在人体肿瘤中的表达差异以及在胃癌及对应癌旁和正常组织中的表达差异;通过下载并提取GEO、TCGA数据库中与CASC7基因相关的实验数据,统计学分析CASC7在胃癌样本中表达丰度及其与胃癌临床分型之间的关系;通过下载CCLE、De Map数据库胃癌细胞系中CASC7基因的表达数据,统计分析该基因在体外培养胃癌细胞的表达含量,并预测该基因与胃癌细胞生长增殖的相关性,根据结果最后确定敲低该基因最有效的实验方法。2.通过RT-qPCR检测体外培养正常胃粘膜细胞GES-1和胃癌细胞SGC-7901、MGC-803的CASC7基因表达水平是否有差异,选择表达差异最大的细胞作为后续实验对象。3.通过RT-qPCR确定最优结合位点的siRNA,利用瞬时转染技术,沉默CASC7,分别进行CCK-8、平板克隆形成细胞增殖实验和划痕、Transwell细胞迁移实验,对结果进行统计学分析,观察CASC7对实验细胞增殖和迁移能力的影响。结果:1、生信分析显示CACS7在人体肿瘤中有差异表达,在胃癌中高表达,且处于胃癌差异表达Lnc RNA的前列;CASC7在胃癌细胞系中高表达(P<0.001),且与胃癌分子分型有关(P<0.001),与临床、Laurén及组织分型无关;与胃癌癌旁组织及正常组织比较,CASC7在胃癌组织中呈高表达(P<0.001)。2、与体外培养正常胃粘膜细胞GES-1相比CASC7在胃癌细胞SGC-7901、MGC-803中高表达(P<0.001),且在胃癌细胞SGC-7901表达高于MGC-803;3、CCK-8、平板克隆形成、Transwell和划痕实验显示,下调CASC7基因后,胃癌细胞SGC-7901的增值、迁移能力下降(P<0.001)。结论:1、生信分析显示,CASC7与胃癌的发生、发展有关;2、CASC7在胃癌细胞SGC-7901中高表达,其表达下调可抑制SGC-7901细胞的增殖和迁移。
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