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目的:周围神经损伤是骨科常见、多发病。虽然近几十年来对周围神经损伤的修复取得了显著进步,但神经功能的恢复仍不满意。再生运动神经的功能恢复最终要靠运动终板的再生与重建,终板的功能状态反映肌肉的功能状态。因此运动终板的变化与临床上治疗措施的选择、意义和疗效之间存在有密切关系,值得深入研究,也为神经修复及选择最佳治疗时机打下基础。近年来,就如何使受损的周围神经功能最大限度得以恢复以及运动终板的再生,国内外学者已做了大量相关的研究工作,发现了一些对神经恢复和运动终板再生有促进作用的生物活性分子及相关药物,而在药物治疗基础上的物理疗法又成为这一领域新的研究热点。有研究发现,分米波可以抑制炎症反应,增加血液循环,改善神经缺血、缺氧,减轻神经周围粘连、卡压,加速损伤神经轴突再生及再髓鞘化,促进再生神经结构成熟,利于损伤神经再生和功能恢复。但关于分米波对受损神经运动终板的作用未见报道。鉴于此,本实验构建大鼠坐骨神经损伤模型,修复后对其局部进行分米波照射,通过肌肉大体观察、肌肉湿重、光镜观察、终板特染、乙酰胆碱酶(AChE)特染等方法,探讨,揭示分米波对周围神经损伤后神经修复与终板再生的作用机制,为临床推广应用提供理论依据。
方法:实验选取成年健康SD大鼠60只,随机分成A组(分米波治疗组)、B(空白对照组)两组,每组30只。
于右大腿制备坐骨神经损伤模型。A组于术后第1天至术后12周,取俯卧、双腿后伸位固定于实验台,损伤局部给与分米波辐射,B组于A组治疗同时行空白对照。术后4、8、12周分别随机取A、B组大鼠各10只,完整解剖分离右腿腓肠肌观察,并用万分之一天平称起湿重,数据行统计学分析。再取腓肠肌下三分之一肌组织行横切面蜡块包埋、切片、HE染色观察腓肠肌肌细胞横截面变化,数据行统计学分析。取上三分之一肌组织切成小块行氯化金特染,光镜下观察运动终板的变化。取中三分之一肌组织,冰冻切片行AChE特染,观察ACHE的含量变化,行光密度测定并统计学分析。
结果:分米波对神经损伤后肌组织湿重,肌纤维直径,截面积,运动终板的再生,AChE含量均有明显的影响。
1.术后4周所有大鼠双侧步态不协调,跛行。坐骨神经菲薄、光泽度差,与之相连的腓肠肌萎缩、弹性差。A组与B组腓肠肌湿重无统计学意义。两组镜下运动终板均出现退变,差别不明显。腓肠肌HE染色肌细胞直径及截面积变小,两组的差异无统计学意义。AChE特染:AChE含量减少,两组运动终板的光密度分析无统计学意义。
2.术后8周A组大鼠较B组:步态协调,跛行轻。坐骨神经粘连轻,圆润、丰满、光泽度好,腓肠肌较饱满、弹性一般。两组腓肠肌湿重有统计学意义。两组肌细胞直径及截面积的差异有统计学意义。A组运动终板数量增加,染色较深,形态多样。B组运动终板数量增加不明显,染色较淡,形态多呈不规则状。AChE特染:A组运动终板数量增加明显,B组变化不明显。两组运动终板的光密度分析有统计学意义。
3.术后12周A组大鼠右后腿步态协调,跛行不易观察。坐骨神经粘连轻,圆润、丰满、腓肠肌基本正常。B组大鼠右后肢步态基本协调,跛行仍可观察到。坐骨神经粘连减轻,圆润、增粗,腓肠肌萎缩减轻、弹性较好。A组与B组腓肠肌湿重统计学有明显差异。两组肌细胞直径及截面积的差异有显著统计学意义。A组运动终板形态与着色接近正常,B组稍差。两组肌细胞直径及截面积的差异有统计学意义。AChE特染:A组运动终板数量明显高于B组,两组运动终板的光密度分析有显著统计学意义。
结论:
1.分米波可以延缓神经损伤后骨骼肌湿重及肌细胞直径和截面积的下降,从而延缓肌组织萎缩发生。
2.分米波能抑制炎性反应,减轻损伤后神经的充血、水肿及周围组织的粘连。
3.分米波能延缓神经轴突和运动终板的退变并促进其再生。
4.分米波能增加乙酰胆碱酶的含量,延缓运动终板的退变、促进终板再生,加快运动动能的恢复。