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目的：抗ABO抗体介导的排斥反应是ABO不相容移植后的主要障碍。然而，抗ABO反应的细胞免疫机制目前仍不清楚。本研究旨在通过分析B细胞亚群的分类及各个B细胞亚群与抗A抗体滴度的关联性来鉴定产生抗A抗体的B细胞亚群。 方法：该研究方案经首尔国立大学机构审查委员会(H-1411-020-623)批准后，在首尔大学医学研究中心进行实验。本实验样品是从首尔大学医院患者及社会募集的健康者体内提取，在首尔大学医学研究中心进行实验及分析。样本是从需要进行腹膜透析的患者和健康的志愿者的腹膜液中收集患者和健康志愿者的人腹膜液和外周血样品。对于患者在导管插入后2周时洗涤腹膜时，从患者的腹膜透析液中取出的整个腹膜液，对腹膜液进行离心从而获得腹膜细胞。之后使用Ficoll(GE Healthcare，Cleveland，OH，USA)，通过梯度离心分离外周血单核细胞(PBMC)。使用BD Pharm LyseTM(BD Biosciences，San Diegeo，CA，USA)对PBMC和腹膜细胞进行红细胞裂解。获得的外周血单核细胞(PBMC)和腹膜细胞用以下抗人抗体染色:blood type(tri)-PAA-fluor(Glycotech，Gaithersburg,MD,USA),anti-CD20(L27),anti-CD27(M-T271),anti-CD43(MEM-59),anti-CD5(L17F12),anti-CD11b(ICRF44),anti-CD1c(L161)(BioLegend，San Diego，CA，USA).使用BD FACS CantoⅡ流式细胞仪(BDBiosciences)进行流式细胞术分析，并使用FlowJo(Tree Star，Ashland，OR，USA)进行数据分析。测量抗血型A抗体滴度用凝胶卡法(ID-System DiaMed，Bio-Rad，Hercules，CA，USA)用于测量人血型A特异性IgM和IgG。将50μL的0.8％RBC和25μL连续稀释的血清样品加入到凝胶卡中，并在室温(IgM)或37℃(IgG)下孵育15分钟。离心10分钟后，基于捕获的凝集物的存在确定滴度。 结果：本研究证实B1细胞，MZB细胞和MZ-B1细胞存在于人外周血中，并证明血液内产生抗A抗体的特异性B细胞富集。产生抗A抗体特异性B1细胞或MZ-B1细胞与抗A抗体滴度呈正相关。这表明存在于人血液中的B1细胞可能是参与抗血型A抗体所产生。B1细胞，特别是CD11b+B1细胞是具有较高比例的产生抗A抗体的一类细胞亚群，并且显示与anti-A IgM滴度呈正相关，表明这些细胞可能主要参与抗A抗体反应。CD11b+B1细胞很可能分泌抗A抗体。与小鼠类似，人B1细胞在腹膜中富集，并且表明A特异性B细胞富集在人外周血的B1和MZ-B1细胞以及人腹膜的细胞中。 结论：该实验通过两种分型方法对B细胞进行分型，并且这两种方法都证实B1细胞产生anti-A抗体。并且证明了人B1细胞的频率与anti-A抗体滴度之间的良好关联。因此人B1细胞是ABO不相容移植中脱敏的潜在治疗靶点。