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目的:探讨志贺毒素Ⅱ型e突变体(shiga toxin Ⅱe varriant,Stx2e)和蓖麻毒素(ricin)诱导非洲绿猴肾细胞系Vero细胞凋亡的作用及其相关凋亡基因的表达。 方法:用硫酸铵沉淀法制备Stx2e突变体粗毒素;经Sephrose 4B柱亲和层析和SephadexG—100凝胶过滤,分离得到ricin。分别用不同浓度的Stx2e粗毒素和ricin处理Vero细胞,采用细胞形态学、AO/EB荧光染色法、DNA Ladder检测细胞凋亡的发生;应用western blotting检测凋亡相关基因Caspase-9、Bax和Caspase-3表达的变化。 结果:Stx2e粗毒素在体外对Vero细胞有明显的诱导凋亡效应,且呈较明显的剂量和时间依赖性;ricin对Vero细胞有诱导凋亡效应,呈较明显的剂量和时间依赖性。在Stx2e粗毒素和ricin作用下,显微镜下可见Vero细胞出现细胞核固缩断裂成碎块,核膜消失,细胞膜完整且有突起,等细胞凋亡征象;2ug/ml Stx2e粗毒素作用24h的Vero细胞,1ug/ml ricin作用36h的Vero细胞AO/EB染色后可分别见90%和18%细胞的胞核染色质凝集,核固缩成团、碎裂,形成凋亡小体。western blotting表明2ug/ml的Stx2e在作用24h后,Bax表达上调,Caspase-9的表达与对照组相比无显著差别,caspase-3的表达明显增强。1ug/mlricin在作用36h后,Bax表达下调,Caspase-9的表达与对照组相比无显著差别,caspase-3表达增强。 结论:Stx2e和ricin有诱导Vero细胞凋亡的作用。Stx2e诱导Vero细胞凋亡与Bax、Caspase-3有关,可能Stx2e通过Bax加速线粒体中细胞色素C的释放,提高Caspases的活性。Stx2e诱导的Vero细胞的凋亡与Caspase-9无关。ricin诱导的Vero细胞的凋亡与和Caspase-3有关,与Caspase-9、Bax无关。Stx2e和ricin均为核糖体失活蛋白,二者使核糖体失活的机制相同,但二者使细胞凋亡的机理不同,可能抑制蛋白质合成和细胞凋亡是两个独立的过程。