FTY720治疗大鼠急性脊髓损伤对淋巴细胞的影响

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目的:本研究从免疫炎性反应的角度探讨急性脊髓损伤(Acute Spinal CordInjury,ASCI)的治疗。通过观察新型免疫抑制剂FTY720治疗大鼠急性脊髓损伤对外周血及局部损伤组织淋巴细胞的影响,以及对大鼠急性脊髓损伤后运动神经功能恢复的影响,揭示FTY720的神经保护作用,探讨其治疗急性脊髓损伤的作用机制。方法:采用Allen's打击法建立T10大鼠急性脊髓损伤模型,将大鼠随机分为5组:A组,正常对照组,6只,不做任何处理直接取材;B组,假手术组,27只,仅行椎板切除,不损伤脊髓,不给药;C组,脊髓损伤组,27只,造模成功后不给药;D组:脊髓损伤+FTY720全身用药组,27只,造模成功后以3mg/kg的FTY720腹腔注射;E组:脊髓损伤+FTY720局部用药组,27只,造模成功后以3mg/kg的FTY720蛛网膜下腔注射。A组老鼠行BBB评分后直接取材。B、C、D、E组行淋巴细胞计数、HE染色、免疫组化染色的老鼠于术后12h、48h、72h、1w取材,BBB评分在术后1d、3d、7d、14d、21d、28d进行。采用流式细胞仪观察各组大鼠术后外周血和局部损伤组织淋巴细胞的变化,采用BBB评分法观察急性脊髓损伤后运动功能的恢复情况,采用HE染色方法观察脊髓组织病理变化,采用免疫组织化学染色方法观察胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达强度的变化。所得结果采用SPSS18.0统计软件及Image-pro plus6.0医学图像分析系统进行统计学处理。结果:BBB评分、HE染色病理学观察、GFAP染色结果均提示应用FTY720治疗大鼠急性脊髓损伤对运动神经功能的恢复具有保护作用,且E组对运动神经功能的保护作用优于D组。外周血中,C组术后各时间点的CD3、CD4、CD4/CD8比值均低于B组,D组应用FTY720后,CD3、CD4、CD8、CD4/CD8比值均较C组有明显下降,E组各指标的变化介于C组与D组之间。局部损伤组织中,C组CD3、CD4、CD8、CD4/CD8比值均高于B组,E组应用FTY720后,CD3、CD4、CD8、CD4/CD8比值均明显低于C组,D组各指标的变化介于C组与E组之间。结论:应用FTY720治疗大鼠急性脊髓损伤能够促进急性脊髓损伤之后运动神经功能的恢复;应用FTY720治疗后可以降低急性脊髓损伤后局部淋巴细胞的浸润; FTY720全身用药具有副作用:可以降低外周淋巴细胞数量,降低机体免疫功能;FTY720局部用药较全身用药的副作用减轻,对运动神经功能的保护作用优于全身用药。
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