安徽省鸡J亚群白血病血清学调查及毒株分离鉴定

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禽J亚群白血病是由禽J亚群白血病病毒(Avian Leukosis Virus subgroup J,ALV-J)引起的鸡骨髓细胞瘤病(Myelocytomatosis,ML)。自1988年Payne L等在肉鸡中发现ALV-J以来,世界许多地区不断有ML病例报道。我国1999年首次从商品肉鸡中检出ALV-J,随后ALV-J在全国蛋鸡、肉鸡和地方品种(系)鸡报道日渐增多,可见ALV-J已在我国鸡群中广泛存在。为详细了解J亚群白血病在安徽省鸡群中感染状况,本研究从安徽省不同地区的22个鸡场随机采样890份,通过ELISA试剂盒进行ALV-J血清抗体检测。结果显示不同地区、不同品种(系)、世代、性别和周龄的鸡群中均存在ALV-J的感染,全省抗体阳性率为9.9%。江南地区鸡场抗体阳性率100%,江淮地区抗体阳性率是71.4%,抗体阳性率为60.0%。地方品种(系)鸡抗体阳性率为18.8%,肉鸡感染为8.2%,蛋鸡抗体阳性率为5.9%。商品代鸡群的抗体阳性率是10.8%而父母代的抗体阳性率为9.5%,公鸡的抗体阳性率为12.6%而母鸡抗体阳性率是9.1%。雏鸡、青年鸡抗体阳性率高于成年鸡。通过接种DF-1细胞和聚合酶链式反应(PCR),从安徽省太湖县某肉种鸡和安徽省宿松县某商品代蛋鸡中各分离到1株ALV-J毒株,分别命名为AH1101株和AH1102株;两分离毒株gp85氨基酸序列与各亚群参考毒株序列进行序列分析,与A至E亚群禽白血病毒株的gp85氨基酸序列同源性介于9.3%~29.7%之间,与J亚群参考毒株同源性为82.1%~99.4%。分离毒株AH1101与J亚群原型毒株HPRS-103氨基酸同源性为97.1%,与国内山东J亚群毒株SD09TA04和SDYC02J氨基酸同源性均是99.4%;序列分析显示碱基和氨基酸突变率分别为1.0%和为6.5%。蛋鸡分离毒株与HPRS-103氨基酸同源性最高为89.0%;碱基和氨基酸突变率分别为8.0%和为9.1%。两分离毒株之间同源性为85.4%,二者之间碱基有48个突变和6个缺失,氨基酸有26个变异和3个缺失。碱基和氨基酸突变或缺失多在高变区hr1、hr2和可变区vr2、vr3内及它们的附近区域。遗传进化分析表明,分离毒株AH1101与山东毒株SD09TA04和SDYC02J可能来源相同,分离毒株AH1102可能为变异的重组毒株,两分离毒株亲缘关系较远。本研究通过系统的血清学调查,确定ALV-J在安徽省内不同地区、不同品种(系)、世代、性别和周龄的鸡群中普遍存在,感染强度不一。分离得到的两株ALV-J毒株为安徽省ALV-J的分子流行病学研究和ALV-J的防控研究提供了理论依据和物质基础。
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