近年来,随着生物医学研究的不断发展,人们发现鹅膏属真菌中的天然肽类毒素不仅可以帮助植物防虫、防病,还可以抑制生物体内癌细胞的无限繁殖,为治疗恶性肿瘤提供了一个新的途径。然而,原材料的短缺,提取效率的低下使得鹅膏菌肽类毒素的生产一直无法满足逐渐扩大的市场需要,最终导致高纯度的鹅膏菌肽类毒素的价格已经超过了100$/mg。因此,选择合适的鹅膏菌,并设计一种简单有效的提取、纯化方式,将为后续工业化生产提供理论和实践支持。本文根据已知鹅膏菌毒素的含量为依据,选择生长于中国湖南省的灰花纹鹅膏菌为实验材料,通过对灰花纹鹅膏菌肽类毒素的检测分析和提取工艺的优化,探索最佳的提取工艺和最有提取价值的肽类毒素;通过对二氧化硅微球制备工艺的不断优化,制备了一种可以用于分离、纯化鹅膏菌肽类毒素的色谱柱填料,并通过实验装置对纯化效果进行了验证。具体内容如下:(1)灰花纹鹅膏菌组织结构的选择和提取工艺的优化:本文分析了不同类型的有机溶剂以及有机溶剂的含量对肽类毒素提取效果的影响,发现含有0.1%三氟乙酸(TFA)的甲醇-水有机溶剂提取灰花纹鹅膏菌肽类毒素的效果较好;分析了灰花纹鹅膏菌不同组织结构肽类毒素的含量,发现菌盖部位作为真菌的生殖器官含有更多的肽类毒素;价格相对低廉的水系滤膜在鹅膏毒素提取实验中与有机系滤膜有着相同的实验结果。(2)灰花纹鹅膏菌肽类毒素的定性、定量分析:本文通过超高液相色谱与质谱联用仪(UPLC-MS)确定了灰花纹鹅膏菌中含有四种肽类毒素,通过拟合得到的关于α-鹅膏毒肽(α-Amanitin)含量的标准线性方程,计算得知灰花纹鹅膏菌中最具有提取价值的α-Amanitin的浓度高达1.0795 mg/ml,干重可达21.5906 mg/g,并探索了一条鹅膏毒肽的快速检测方式。(3)二氧化硅微球的制备和使用效果:本文通过正硅酸乙酯(TEOS)水解的原理制备纳米级SiO2微球,当SiO2微球的固含量为2%时,通过喷雾干燥,在600℃下保温4h,可以得到粒径分布2.75 μm-3.85 μm的SiO2微球,经过该微球洗脱纯化之后的鹅膏菌粗毒液的紫外最大吸收波长与α-Amanitin标准样品的最大吸收波长一致,说明该制备的SiO2微球作为色谱柱填料具有纯化α-Amanitin的效果。