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邻苯二甲酸酯类(Phthalic Acid Esters,PAEs)是一种广泛使用的增塑剂和软化剂,可使聚氯乙烯类的塑料由硬塑胶变为有弹性的软塑胶,提高产品的可塑性、柔韧性。因PAEs与塑料之间以稳定性差的氢键和范德华力联结,当环境条件转变容易逸出到环境中。PAEs是环境激素类有机污染物的一种,其毒性影响类似于雌性激素,还具备致畸致癌致突变的三致毒性,对生物个体发育、新陈代谢等产生不利影响,可通过地表径流、大气沉降、洋流等作用进入海洋生态系统,危害水生生物乃至整个海洋生态系统的稳定,并可通过食物链传递危害人类健康。目前塑料制品的大批量使用已使PAEs成为全球普遍存在的一种污染物,我国及世界范围内的海水、沉积物、海洋生物等环境样品中均有检出。因而,创立PAEs的快速检测方法,深入探讨其毒性影响及致毒机理等意义重大。本研究以目前使用量较大、名列污染物黑名单的邻苯二甲酸二丁酯(DBP)为研究对象,针对海水基质影响因子多、污染普遍、样品前处理繁杂等情况,通过优化固相萃取洗脱液处理过程、溶剂选择、上样方式和洗脱液用量等条件来提高萃取效率,获得了最优实验条件,建立了一种适用于大批量海水分析、方便快捷的固相萃取-气相色谱检测海水中DBP的方法,以期为海洋环境中PAEs的检测提供技术支持和方法基础;并利用该方法对福建省漳州市东山湾的海水样品进行测定,分析该区域海水中DBP的污染及分布情况。此外,利用室内模拟实验方法,研究了不同DBP浓度和时间条件下,DBP对中肋骨条藻(Skeletonema Costatum)和海水小球藻(Chlorella autotrophica)的光密度(Optical Density,OD)、叶绿素a(Chl-a)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性以及丙二醛(MDA)含量的影响,以期比较不同浓度DBP暴露下对两种藻类生长及毒性的影响差异,为DBP在不同藻类间的毒性差异和致毒机理提供一定的数据支撑。具体研究结论如下:(1)优化了上样方法、溶剂选择、洗脱液用量及洗脱液处理进程等固相萃取前处理条件:发现了手动上样虽较自动上样速度慢但本底值大大降低,且平行样间相差较小,结果较理想;选取乙酸乙酯为洗脱剂,最优用量为10 mL;对比了加入无水硫酸钠、纯化硫酸钠以及直接浓缩三种处理过程对DBP回收率的影响,不加无水硫酸钠直接用氮吹浓缩的方法较好;对比了四种常用定容溶剂正己烷、二氯甲烷、丙酮和甲醇配制的10个DBP质量浓度下的线性关系及同一浓度连续进样五次的残留量,甲醇效果最优。(2)建立了海水中DBP的气相色谱分析方法:样品由玻璃纤维滤膜过滤,玻璃C18固相萃取柱富集,乙酸乙酯洗脱,氮吹浓缩后1 mL甲醇溶解定容,气相色谱氢火焰离子化检测器测定,外标法定量。利用线性范围、准确度、精密度、检出限、定量限和回收率评价检测方法:DBP在6-240 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数R大于0.995,加标量为30-60 ng/mL范围内回收率为89.93-109.82%,相对标准偏差3.80%-4.02%。该方法在5 ng/mL以上检测可信,可定量高于10 ng/mL样品。(3)漳州海水样品湾内DBP含量较湾外高,含量可达到34.59ng/mL,在海湾停船地点附近和靠近附近工厂取水排水口的站位DBP含量较高,其含量变化与当地地理水文条件及人类活动具有一定相关性;通过对天然海水样品的检测,发现该方法可满足对多个站位大批水样的快速处理和测定需要,对分析PAEs含量和评估其生态风险有一定意义。(4)DBP对中肋骨条藻和海水小球藻的96h急性毒性实验的半最大效应浓度(EC50)分别为3.85mg/L和5.20mg/L,中肋骨条藻对DBP较海水小球藻敏感。DBP对中肋骨条藻和海水小球藻的OD和Chl-a均有胁迫作用,但藻种间影响略有不同,主要与两种藻细胞比表面积和细胞膜物质构成有关。(5)DBP还会引起中肋骨条藻和海水小球藻的氧化应激反应,高浓度DBP暴露下两种藻的SOD和CAT活性均升高,但两种藻受胁迫程度不同:中肋骨条藻SOD和CAT活性在低浓度DBP暴露下略有降低而高浓度下明显升高:海水小球藻SOD酶活性略有增加,而CAT活性随时间和DBP浓度升高而明显上升。这可能是由于两种藻细胞的组成不同进而对DBP靶点及消耗情况不同造成的。(6)DBP均会引起中肋骨条藻和海水小球藻脂质过氧化反应,两种藻MDA含量在低浓度DBP暴露下呈上升趋势而高浓度暴露下不再增加;中肋骨条藻由DBP引起脂质过氧化所需的时间更短,对DBP更敏感。(7)选取中肋骨条藻和海水小球藻在DBP浓度由低到高时OD、Chl-a、SOD、CAT和MDA 5个因子的变化情况进行整合生物标志物分析(IBR)和主成分分析(PCA)。PCA分析得出:两种藻和DBP浓度解释了总变量的81.42%,实验设计合理;IBR分析表明DBP对的两种藻类的影响情况不同,并存在浓度依赖性。