【摘 要】
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目的:探讨micro RNA-214/218(miR-214/218)及Claudin-2蛋白在急性肾损伤(AKI)模型鼠中再灌注不同时间点的表达及意义。方法:以雄性C57BL/6J小鼠为研究对象,随机分为空白对照
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目的:探讨micro RNA-214/218(miR-214/218)及Claudin-2蛋白在急性肾损伤(AKI)模型鼠中再灌注不同时间点的表达及意义。方法:以雄性C57BL/6J小鼠为研究对象,随机分为空白对照组(C组)、假手术组(S组)和缺血再灌注模型组(IR组),其中假手术组和缺血再灌注模型组根据再灌注后不同时间点各分为0h、12h、24h、48h、3d、5d共6个亚组。实时荧光定量(q RT-PCR)检测miR-214/218、Claudin-2 m RNA表达;Western Blot检测Claudin-2蛋白表达水平;免疫组化法检测Claudin-2在肾组织的表达分布;HE染色观察肾组织病理损伤情况;肾脏病理评分计量肾脏损伤程度。结果:IR组缺血再灌注之后肾脏病理损伤评分水平逐渐增高,24 h损伤最严重,此时的病理损伤评分为3.30±0.130,然后损伤逐渐恢复,C组和S组无明显病理损伤,IR组与S组同时间点亚组间肾脏病理损伤评分差异有统计学意义(P﹤0.05);IR组Claudin-2m RNA及Claudin-2蛋白质表达在再灌注后均逐渐降低,至再灌注24h Claudin-2m RNA表达水平最低,较基线值降低3.85倍,Claudin-2相对表达水平至再灌注24h为3.30±0.130,IR组与S组各相同时间点亚组Claudin-2 m RNA表达水平差异有统计学意义(P﹤0.05);IR组在0h~5d Claudin-2蛋白质的表达分布差异有统计学意义(P﹤0.05)。小鼠肾缺血再灌注之后miR-214/218表达均逐渐上调,于24h达峰值水平,分别较基线值上升7.42倍和12.92倍,随后逐渐回落至基线值水平,C组和S组miR-214/218持续低水平表达。结论:miR-214/218及Claudin-2蛋白表达水平变化与缺血再灌注后肾损伤有关,但miR-214/218与Claudin-2二者之间的具体调控关系仍需进一步的研究。
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