蒿属植物转录组测序与青蒿素合成途径特异性研究

来源 :中国科学院大学 中国科学院上海生命科学研究院 上海辰山植物研究中心 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chengyihan
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蒿属植物黄花蒿(Artemisia annuaL.)的分泌型腺毛内可合成青蒿素,青蒿素具有抗虐疾的作用。通过对9个蒿属植物与黄花蒿近缘种、品种的转录组测序表明:在这些近源种中青蒿素合成途径的所有基因的直系同源基因均存在,这些直系同源基因在不同种中的表达水平存在一定的差异,萜类合酶的数目、倍半萜基因的序列多态性在不同种中同样存在一定的差异。蒿属植物的青蒿素和青蒿酸HPLC测定表明,青蒿素和青蒿酸是黄花蒿的特异产物,其他种中均没有青蒿素的累积,均含有青蒿素的黄花蒿不同品种青蒿素的含量存在差异。在蒿属植物近源种中克隆到了青蒿素合成途径的ADS、CYP71AV1和DBR2的直系同源基因,这些直系同源基因的ORF大小一致,序列相似性达到95%-99%,它们的活性区域核苷酸存在几个SNP。对ADS直系同源基因的体外酶活研究表明:所有ADS同源基因在以FPP为底物时主产物均为紫穗槐-4,11-二烯,且含有另2个结构未知的倍半萜类副产物,不同近源种的酶活性参数和主产物、副产物的含量有差异;同时对蒿属植物叶片和花序的挥发成分的GC/MS测定发现均有紫穗槐-4,11-二烯和ADS基因体外酶活的两个副产物存在。由此可见ADS直系同源基因进化产生的SNP突变和紫穗槐-4,11-二烯不是青蒿素在黄花蒿中特异合成的原因。同期有日本研究表明蒿属植物CYP71AV1直系同源基因的S479F突变导致了紫穗槐-4,11-二烯只能氧化到青蒿醛,而不能氧化到青蒿酸,推测可能该突变导致了青蒿素在青蒿中特异合成。
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