桃褐腐病菌杀菌剂抗性监测及MBC类杀菌剂抗性菌株表征

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桃是一种温带水果,在世界范围内不同条件下均有种植。由Monilinia fructicola引起的褐腐病是桃子上毁灭性真菌病害之一。该病在果实收获前和采收后均可造成严重损失。生产中尽管采取了修剪,清除枯枝落叶和消除野生李属植株等防治措施,但化学防治仍然是控制该病的重要手段。中国目前广泛使用二甲酰亚胺类(DCF),苯并咪唑类(MBC),甾醇脱甲基酶抑制剂(DMI)和甲氧基丙烯酸酯类(QoI)等杀菌剂来控制褐腐病。本研究从中国十四个省、自治区或直辖市的商业桃园广泛收集病样,从中获得245株单孢菌株。通过形态学观察及分子生物学鉴定,发现所有245株褐腐病菌皆为M.fructicola。采用鉴别浓度测定了相关菌株对多菌灵、异菌脲、丙环唑和嘧菌酯等杀菌剂的敏感性。结果发现,所有菌株对异菌脲、丙环唑和嘧菌酯均敏感。但来自山东,北京和河北省的7株菌株产生了对多菌灵的抗性。全国菌株多菌灵抗性频率为2.86%,其中山东省8.33%的菌株具有抗药性,在被调查省份中抗药性比率最高。研究发现,多菌灵抗性菌株环境适合度未发生明显变化,且多菌灵与乙霉威具有负交互抗性。分子检测发现多菌灵抗性菌株β-微管蛋白基因发生了E198A突变,离体桃接种试验表明生产中推荐剂量的多菌灵无法有效防治此类抗性菌株。此外,采用系列浓度测定了50个菌株对4种杀菌剂的敏感性。结果发现褐腐病菌M.fructicola对异菌脲的有效抑制中浓度(EC50)值为0.08-0.23μg/ml,平均值为0.15μg/ml。对丙环唑的EC50值为0.001-0.014μg/ml,平均值为0.004μg/ml。对嘧菌酯的EC50值为0.02-0.24μg/m L,平均值为0.06μg/ml。供试菌株对异菌脲、丙环唑和嘧菌酯的EC50值分布频率呈单峰分布,表明没有抗性发生,而对多菌灵的EC50值分布频率呈双峰分布,表示一些M.fructicola菌株已经产生了对多菌灵的抗性。虽然褐腐病菌已经产生了对多菌灵的抗性,但其对敏感菌株具有很高的抑制效率,对敏感菌株的EC50为0.04-0.09μg/ml,平均值为0.06μg/ml。研究结果表明,二甲酰亚胺类杀菌剂,甾醇脱甲基酶抑制剂和甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂能有效防控中国桃褐腐病。然而,褐腐病菌对苯并咪唑类杀菌剂多菌灵的抗性在局部地区已经发生,对其抗性进行监测对制定合理防控策略十分重要。考虑到多菌灵抗性仅在局部发生,而且多菌灵对敏感菌株的抑制活性很高,此类杀菌剂仍然可以在尚未发生抗性的区域进行使用。
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