OsRACK1抗干旱/盐胁迫的生理与分子机理研究

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干旱和盐胁迫是影响植物生长发育的重要逆境因素,已有研究表明,拟南芥rack1突变体对干旱和盐胁迫具有很强的耐旱性。进一步研究发现拟南芥RACK1在ABA信号转导通路中起负调控作用。用本实验室构建好的日本晴、干扰、反义株系和过表达水稻株系为材料,运用植物生理生化学、分子生物学等手段,以日本晴为背景的水稻RACK1转基因材料,过表达株系738和749,反义株系676,RNAi干扰株系3-1和4-2,探讨OsRACK1蛋白在干旱和盐胁迫等生物学过程中的生理和分子机理作用。研究结果如下:  1.在20%PEG模拟干旱和2%NaC1盐胁迫下,RACK1干扰和反义材料的净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)和蒸腾速率(Tr),相对含水量,SOD,POD,CAT和内源ABA含量高于日本晴和过表达材料,日本晴居中,RACK1过表达材料的这些指标低于日本晴。RACK1干扰和反义材料的光合效率比日本晴高,过表达材料的光合效率低于日本晴,因此在干旱和盐胁迫逆境下RACK1过表达材料的抗逆性相对较差。过表达材料在干旱和盐胁迫处理下内源ABA上升最慢,导致气孔关闭程度最弱,在逆境下容易失水,与它较高的离体叶片失水率和较低的相对含水量结果符合。  2.干扰和反义材料的MDA高于于日本晴和过表达材料,过表达材料的MDA最高。离体叶片失水率干扰材料3-1和4-2失水最慢,反义和日本晴材料的失水率无显著差异,过表达材料738和749失水最快。干扰和反义材料的膜脂氧化程度较轻,加之有较高的抗氧化酶活性,清除干旱和盐胁迫带来的氧化伤害较强,因此RACK1干扰材料具有较强的抗旱性和抗盐性。  3.ABA合成关键基因NCED在模拟干旱和盐处理后,干扰和反义材料的ABA合成关键基因NCED5的表达量高于日本晴,过表达材料的NCED3和5的表达量低于日本晴,与之前的内源ABA含量结果符合,内源ABA高的RACK1反义材料的NCED的表达量也高。  4.ABA有4种响应基因OsABI5、OsLEA3、OsLIP9、与OsRAB16A,干扰和反义材料的响应基因表达量最高,日本晴的表达量居中,过表达材料的表达量最低,OsRACK1在模拟干旱和盐胁迫响应的ABA信号通路中可能起负调控作用。  根据以上结果,认为RACK1在水稻中的作用与在拟南芥中相似,在植物干旱和盐胁迫胁迫下都发挥作用。RACK1参与了ABA信号通路,并负调控ABA信号,RACK1蛋白对水稻的耐旱性和耐盐性具有负调控作用,干旱和盐胁迫能使RACK1表达量下调与其内源ABA升高有关。
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