14-3-3是一类在真核细胞中普遍存在并且高度保守的酸性蛋白家族。研究发现,有150多种蛋白以磷酸化依赖或非磷酸化方式与14-3-3蛋白家族发生相互作用,参与许多细胞生理过程,包括细胞信号传导、细胞周期调控、细胞凋亡等。14-3-3蛋白家族在哺乳动物中有7个成员,即β,γ,ε,η,σ,τ和ξ。实验以14-3-3ε为诱饵蛋白,对人胎脑cDNA文库进行酵母双杂交体系筛选,寻找14-3-3ε相互作用蛋白。所得到一个新的阳性克隆是人KICβ基因,与14-3-3ε相互作用。KICβ是微管运动蛋白家族的一个成员,其功能是以微管为轨道运输突触前体,参与诱导肿瘤细胞程序性凋亡。为了确定二者的相互作用区域,构建KICβ的分段重组体,通过与14-3-3ε诱饵蛋白的酵母双转验证。结果显示,与14-3-3ε蛋白发生相互作用的区域位于KICβ的847-1226氨基酸。通过亚细胞定位,研究14-3-3ε和KICβ在HeLa细胞中的定位情况。结果显示,KICβ主要在细胞浆中表达,少量分布在细胞核中。共表达14-3-3ε和KICβ,发现两者共定位于细胞质,这表明二者之间存在相互作用。通过蛋白质体外结合实验(GST Pull-down),证明14-3-3ε与KICβ的相互作用是特异的。