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以β淀粉样蛋白成分为主的老年斑(senile plaque)胞外沉积和神经元内神经原纤维缠结(NFTs)是阿尔茨海默病(AD)的特征性病理改变。近年来,淀粉样蛋白假说(the amyloid hypothesis),即淀粉样蛋白沉积是AD最初起因的观点,得到了广泛的认同。
本实验采用原代培养的大鼠皮层神经元,用Western blot和RT-PCR的方法,观察给予雌激素等药物后细胞内APP基因转录和表达的变化,以及培养液中非淀粉样蛋白—可溶性的APPα(soluble APPα,sAPPα)含量的变化。我们观察到,给予17 β雌二醇(17 β-estradiol)不能改变APP的基因转录与表达,但可以增加培养液中sAPPα的量,表明A β的生成减少。用不能透过细胞膜的β-estradiol 6-(O-carboxymethyl) oxime:BSA处理培养的神经元,也可使sAPPα含量升高,但其作用弱于相同浓度的17 β-estradiol;17 β-estradiol的异构体17α-estradiol不能改变细胞培养液中sAPPα含量;蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)的抑制剂Calphostin C可阻断17 β-estradiol引起sAPPα含量升高的作用,而雌激素受体拮抗剂ICI182,780并不影响17 β-estradiol引起sAPPα含量升高的效应。
上述观察结果证明雌激素作用于神经元细胞膜上的相应结合位点,通过一定的信号转导过程,导致sAPPα的生成增加,这个过程中有PKC参与;在雌激素产生这一效应的过程中,雌激素作用的神经元细胞膜上的雌激素结合位点的结构,可能不同于经典的核内雌激素受体,并且受体同配体的结合要求配体具有某种特定的空间构型。