【摘 要】
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作为明星大环化合物之一,β-环糊精（β-CD）是由7个D-吡喃葡萄糖残基组成的环状寡糖。β-CD不仅拥有疏水内腔,可以通过主-客体相互作用包合非极性的客体分子;其外缘拥有大量的极性羟基基团,具有亲水性。因此β-CD既是超分子组装体的理想构建单元也是良好的亲水化合物。鉴于上述特点,基于β-CD构建的超分子组装体已在多个研究领域引起了关注,尤其是生物化学领域。β-CD超分子组装体具有优异的生物相容性和
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作为明星大环化合物之一,β-环糊精（β-CD）是由7个D-吡喃葡萄糖残基组成的环状寡糖。β-CD不仅拥有疏水内腔,可以通过主-客体相互作用包合非极性的客体分子;其外缘拥有大量的极性羟基基团,具有亲水性。因此β-CD既是超分子组装体的理想构建单元也是良好的亲水化合物。鉴于上述特点,基于β-CD构建的超分子组装体已在多个研究领域引起了关注,尤其是生物化学领域。β-CD超分子组装体具有优异的生物相容性和低毒性。除此之外,超分子组装体的性能通常优于单个构建单元,具有更加复杂的结构和功能。β-CD超分子组装体已被广泛应用于药物递送、释放,细胞成像以及体外治疗等生物化学研究中。蛋白质糖基化和磷酸化是两种最常见且重要的蛋白质翻译后修饰类型。二者在生物体内起着关键作用,调节几乎所有的细胞活动。许多重大疾病的发生和发展都与异常的蛋白质糖基化和磷酸化相关,因此糖肽和磷肽的检测分析有助于疾病生物标志物的发现和临床疾病的预测与诊断。基于质谱（MS）技术的蛋白质糖基化和磷酸化肽的检测方法受到低电离效率和非目标肽的强信号干扰,导致直接检测可行性极低。因此在MS检测前,对糖肽和磷肽进行高效富集是至关重要的。近年来,β-CD超分子组装体在糖肽和磷肽富集中的应用受到高度关注。本文基于β-CD利用主-客体化学构建了新颖的超分子组装体,制备过程简单、条件温和,得到的超分子组装体具有良好的选择性、优异的生物相容性以及快速的磁响应性。通过与基底辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）联用,用于实际生物样品中低丰度糖肽、磷肽的富集与检测。具体内容分为以下两个部分:1.制备了一种新型磁性β-CD主-客体亲水材料（MCDC）,结合MALDITOF MS用于糖肽的富集和检测。通过简单的自组装过程制备的MCDC富集材料,由于半胱氨酸（L-Cys）修饰的金刚烷客体分子和磁性基底的存在,不仅具有出色的亲水性,还表现出快速的分离效率。基于MCDC构建的糖肽检测方法具有低检测限、高选择性和高重复性的特点,已成功地用于从标准样品和实际样品中高效地分离富集糖肽。2.制备了一种新颖的β-CD基富集材料,磁性β-CD主-客体金属-多酚网络即mTiCD@AG。通过主-客体相互作用制备的mTiCD@AG利用谷胱甘肽（GSH）和糖肽之间的亲水相互作用以及Ti离子与磷肽之间的强配位作用,使其具有出色的同时富集糖肽和磷肽的能力。结合MALDI-TOF MS检测,基于mTiCD@AG的糖肽和磷肽分析方法表现出优异的选择性、超高的灵敏度和良好的稳定性。mTiCD@AG已成功用于人血清样品中糖肽和磷肽的同时富集,证明了该方法具有较好的实际应用能力。
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