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飞蝗作为重要的农业害虫之一,对我国农作物及牧草的为害较大。金龟子绿僵菌作为一类重要的生物防治真菌,具有致病力强,对人、畜及农作物无害,在对飞蝗的防治过程中已得到广泛应用。由于绿僵菌对昆虫的毒力作用过程缓慢,实际应用中又受环境因素、施药方式、制剂质量的影响,达不到预期的防治效果。因此在本实验中将低剂量杀虫剂与金龟子绿僵菌联合施用防治飞蝗,并对其作用效果及增效原因进行研究。主要研究结果如下:1.在相同的饲养条件下与田间种群比较,飞蝗纯化种群具有较高的孵化率、存活率、产卵量、净增殖率和内禀增长率。纯化种群中全酯酶ESTs、酚氧化酶PO、乙酰胆碱酯酶ACh E、过氧化物酶POD和过氧化氢酶CAT的酶活力值都集中分布,纯化后的飞蝗遗传背景单一,基本满足后续实验中与病原真菌的免疫研究。2.将绿僵菌和多种杀虫剂以2:8或8:2联合作用于飞蝗,处理7天后检测两者的作用效果,结果发现绿僵菌和新烟碱类杀虫剂环氧虫啶及吡虫啉联合存在增效作用;绿僵菌和有机磷类杀虫剂马拉硫磷、拟除虫菊酯类杀虫剂高效氯氰菊酯和生长调节剂类甲氧虫酰肼以8:2联合作用都具有增效作用;绿僵菌和酰胺类杀虫剂氯虫苯甲酰胺以8:2和5:5联合具有增效作用。3.将绿僵菌和多种杀虫剂联合作用于飞蝗,处理7天后检测飞蝗体内生化酶活力变化,经分析可知飞蝗体内多功能氧化酶MFO酶活力都升高,可能与绿僵菌和环氧虫啶或吡虫啉联合增效有关。MFO和PO酶活力都升高,可能与绿僵菌和马拉硫磷在8:2时增效有关。MFO酶活力升高,PO酶活力降低可能与绿僵菌和高效氯氰菊酯在8:2时增效有关。MFO、ESTs和ACh E酶活力升高可能与甲氧虫酰肼和绿僵菌增效有关。4.不同浓度绿僵菌和氯虫苯甲酰胺连续处理飞蝗6天,并测定相关10种生化酶活力。结果发现两者协同抑制侵染前期谷胱甘肽硫转移酶GST、ESTs和PO及侵染后期超氧化物歧化酶SOD,POD和CAT酶活力。而激活侵染前期芳基酰胺酶AA和几丁质酶CHI及侵染后期ACh E酶活力影响寄主死亡率。绿僵菌和氯虫苯甲酰胺协同可以有效抑制寄主体内生化酶参与的寄主免疫,飞蝗死亡率升高可能与寄主钙离子失衡相关。5.在本实验中通过对飞蝗免疫相关基因表达调控分析,绿僵菌和氯虫苯甲酰胺协同抑制寄主识别蛋白GNBP1对绿僵菌的免疫识别,抑制Toll和d My D88参与抗菌肽合成信号传导,抑制酚氧化酶原PPO1和PPO2参与酚氧化酶级联反应,GNBP1和Toll可能是绿僵菌抑制寄主免疫的分子靶标。本研究初步探索了杀虫剂和绿僵菌协同作用对飞蝗免疫的影响,为今后绿僵菌解除寄主免疫的机制研究提供理论指导。