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布比卡因(Bupivacaine)是一种长效酰胺类局麻药,具有麻醉作用时间长,麻醉作用效果强的特点,在临床上广泛应用于硬膜外阻滞,蛛网膜下腔阻滞,臂丛神经阻滞等,但是布比卡因也有一定的毒副作用,主要表现在中枢神经系统毒性和心脏毒性,其中心脏毒性表现最明显,布比卡因的心脏毒性主要表现为负性肌力和负性传导,如PR间期和QRS间期延长,心动过缓、室性早搏,以及室性心动过速,严重的可以出现室颤甚至心脏骤停(Cardiac Arrest)。一旦出现心脏骤停复苏非常困难。有研究表明用脂肪乳可以治疗因布比卡因引起的心脏骤停,但是相关机制仍不太清楚,目前对脂肪乳治疗布比卡因引起的心脏骤停机制主要集中在脂质池假说,线粒体能量代谢假说,离子通道假说等方面。本研究通过建立布比卡因心脏骤停脂肪乳复苏的动物模型,通过测定心肌组织中布比卡因浓度,并测定心肌组织中线粒体能量代谢的关键酶的活性来揭示脂肪乳治疗布比卡因心脏骤停的可能机制,为临床研究提供相关理论依据。目的通过建立布比卡因引起的心脏骤停并用脂肪乳进行治疗的动物模型,观察脂肪乳治疗布比卡因心脏骤停的效果,并结合相关实验室检查来探讨其对布比卡因引起的心脏骤停治疗的相关机制,为临床研究提供相关理论依据。材料与方法1研究对象24只健康成年SD大鼠(体重280-320g)雌雄不拘,由河南省实验动物中心提供。2实验方法24只SD大鼠随机分为两组,每组12只,A组为布比卡因致心脏骤停组,B组为布比卡因致心脏骤停,脂肪乳复苏组。20%的盐酸氯胺酮100mg/kg复腔注射麻醉后,将动物仰卧固定于动物实验台,手术部位常规消毒后行气管切开,气管插管,颈总动脉穿刺,机械通气,股静脉穿刺,之后分别给A组和B组大鼠于股静脉注射10mg/kg0.5%盐酸布比卡因致心脏骤停,A组大鼠于心脏骤停后静脉注射15ml/kg生理盐水和肾上腺素10μg/kg,每分钟重复一次,总共3次,之后每5min注入肾上腺素10μg/kg。,并行人工心肺复苏(CPR),B组大鼠于心脏骤停后股静脉注射15ml/kg20%脂肪乳和肾上腺素10μg/kg,每分钟重复一次,总共3次,之后每5min注入肾上腺素10μg/kg,并进行人工心肺复苏。实验过程中连续监测大鼠的ECG,HR,BP等基本生命指证.心肌组织和血浆中盐酸布比卡因的浓度的测定用高效液相色谱法,这种检测方法是一种液-液萃取法,其中萃取液是由正己烷和叔甲醚组成的混合液,将甲醇和三乙胺盐缓冲液组成的混合液的pH值调至3.0,该混合液为流动相。色谱柱为Dima C18色谱柱,柱温30℃,检测波长为215nm,流速1.0ml/min:色谱进样量为25μl。2ml的50%甲醇作为溶剂与0.5mg心脏组织一起匀浆,取200μ1匀浆液与100μ1的4%NaOH溶液混合后在一起涡旋30秒,在涡旋好的混合液中加入3m1萃取液,之后再涡旋3min,将涡旋好的混合液于3000r/min离心10min,取有机相2m1于离心管中,将其放置于水浴箱中,将温度调至35℃,在水域的条件下用氮气把有机相吹干,把100μ1流动相加入锥形瓶中与所得的干燥残留物混合涡旋30秒,然后放置离心机中将转数设置成12000r/min,高速离心10min,用移液器精确量取75μ1离心好的上层液,放入250μl管形瓶中,HPLC系统每次自动抽取25μ1检测。并用ELISA检测法测定心肌组织中肉碱-脂酰肉碱转移酶(CACT)的活性。3结果1两组动物基本生命BP,HR,WET等无明显差异(P>0.05)。2与A组大鼠相比,B组大鼠血浆中布比卡因含量明显升高,而心肌组织中布比卡因含量明显降低(P<0.05)。3与A组大鼠相比,B组大鼠心肌组织CACT酶活性升高(P<0.05)。4结论大量的布比卡因快速入血会引起严重的心脏毒性,出现心律失常和心脏停搏,脂肪乳通过脂质池效应和逆转布比卡因对线粒体CACT酶的抑制来治疗布比卡因所致的心脏停搏。