本文针对金黄色葡萄球菌23S rDNA、志贺氏菌iapH、单增李斯特菌iap基因分别设计一对特异的寡核苷酸引物和探针,目的是建立一种能同时检测三种食源性病原菌的液相基因芯片方法。通过多重PCR反应进行优化扩增,获得大小为246bp、112bp和174bp的目的片段,将其测序结果与已发表的基因核苷酸序列比较,三种菌目的片段同源性分别为97％、98％、95％:然后将目的片段与偶联探针的微球杂交优化,确定杂交温度为54℃,杂交时间为25min;最后通过液相基因芯片技术检测三种病原菌,确定金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌、志贺氏菌灵敏度分别是38CFU／ml、44CFU／ml、21CFU／ml,而多重PCR方法检测到的三种致病菌基因的灵敏度分别是380CFU／ml、470CFU／ml、240CFU／ml。可见,本课题建立液相基因芯片方法检测三种病原菌灵敏度要比多重PCR方法高10倍。通过以上研究,初步建立了检测三种致病菌液相基因芯片的方法,为食物中毒诊断及食品检测提供了一种可靠有效方法。因此,它也将成为今后食品检验领域中一种重要检验方法,具有良好的应用前景。